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HPLC色譜柱的分類(lèi)及常見(jiàn)故障介紹

來(lái)源:廣州譜分儀器有限公司   2022年07月29日 17:52  
HPLC色譜柱(分離柱)是非常重要的部件之一,一般可分為反相柱、正相柱、其他柱三類(lèi)。
 
①反相色譜柱:它是使用最多的一種色譜柱;一般約占70%;其中,C18柱約占65%;C8柱占15%左右;苯基柱<5%。反相色譜是目前應(yīng)用得最為廣泛的一種高效液相色譜方法。C18在反相色譜中應(yīng)用得最為廣泛。大概超過(guò)一半。
 
②正相色譜柱:正相色譜柱也經(jīng)常被使用,它約占20%。
 
③其他色譜柱(手性柱、離子交換柱):約占10%。
 
HPLC色譜柱的常見(jiàn)故障有哪些?
 
1、柱壓過(guò)高
可能是微粒堵塞. 柱床膨脹,不可逆吸附, 細(xì)菌生長(zhǎng)等造成的。也有可能是系統(tǒng)反壓?jiǎn)栴}, 例如阻尼器堵塞,進(jìn)樣器堵塞, 管路或連接口堵塞。 在線過(guò)濾器不干凈, 壓力傳感器不準(zhǔn)確等。
2、柱效低
可能是色譜柱被污染、 過(guò)濾片部分堵塞、色譜柱內(nèi)的死體積造成,例如流動(dòng)相pH值或者組成不合適造成固定相損失。 流動(dòng)相急劇變化造成固定相物理?yè)p壞, 機(jī)械振動(dòng)造成固定相產(chǎn)生裂縫,柱床收縮或干枯。也有可能是儀器連接的問(wèn)題, 認(rèn)真檢查進(jìn)樣器、檢測(cè)器、 管路、 保護(hù)柱和在線過(guò)濾器等是否連接好,也可能是色譜柱沒(méi)有平衡好, 進(jìn)樣量過(guò)大等問(wèn)題。
3、重復(fù)性差、不出峰、回收率低
可能是色譜柱被污染, 流動(dòng)相 pH值或者組成不合適造成固定相損失 , 樣 品溶劑 不同或樣品本身不穩(wěn)定, 固定 相極性過(guò)強(qiáng)或者流動(dòng)相極性過(guò)弱. 或者發(fā)生非特異性吸附。也可能梯度實(shí)驗(yàn)時(shí)平衡時(shí)間不足,溫度波動(dòng), 流動(dòng)相組成改變, 樣品溶劑不同, 樣品穩(wěn)定性不好,方法的開(kāi)發(fā)不好, 緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足。

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