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圓二色光譜(簡稱CD)是應(yīng)用廣泛的測定蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的方法，是研究稀溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的一種快速、簡單、較準(zhǔn)確的方法。它可以在溶液狀態(tài)下測定，較接近其生理狀態(tài)。而且測定方法快速簡便，對構(gòu)象變化靈敏，所以它是目前研究蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要手段之一，并已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中。
圓二色光譜儀的測試注意事項(xiàng)
(1) 在標(biāo)準(zhǔn)操作時(shí)，譜帶寬度選為1 nm。對于高分辨率測量，要用較窄的狹縫寬度，此時(shí)光電倍增管的電壓較高，譜的信噪比差。雖然對于正常測量最佳譜帶寬度是1~2 nm，但是在下列情況下要犧牲分辨率而需要較寬的狹縫寬度。當(dāng)樣品的吸光度很高但CD信號很弱時(shí)，一方面要盡量保證測定CD峰所需要的足夠濃度，另一方面要設(shè)置較寬的狹縫。不過此時(shí)要特別小心，因?yàn)闃悠吩谖舛冗^高(A>2)的情況下可能存在熒光或雜散光引起的某些假象。另外，在固體CD光譜測試時(shí)也需要較大的狹縫寬度(一般要求 > 2 nm)。
(2)橢圓率和摩爾橢圓率都依賴于測量條件。因此，溫度、波長和樣品濃度總是應(yīng)該特別注明的。
(3) 當(dāng)用壓片法或石蠟油研磨法進(jìn)行固體粉末樣品測試時(shí)，要盡可能地研磨獲得細(xì)小均勻的樣品顆粒。采用石蠟油糊方法時(shí)，必須注意某些憎水有機(jī)化合物可能溶于石蠟油中，這時(shí)所得CD光譜在某種意義上應(yīng)視為溶液CD光譜。采用壓片法測試固體CD時(shí)，在保證手性樣品的定性濃度達(dá)到CD光譜儀檢測要求的同時(shí)，片越薄越透明越好(但切忌破損)。在某些情況下，壓片法不適用于手性抗衡陰離子存在下的固體誘導(dǎo)CD光譜的測定。
圓二色光譜儀使用時(shí)發(fā)生故障怎么做
1、儀器發(fā)生故障時(shí)應(yīng)及時(shí)報(bào)告技術(shù)人員處理.儀器發(fā)生異?，F(xiàn)象時(shí)，馬上關(guān)閉電源，保護(hù)現(xiàn)場并及時(shí)上報(bào)。
2、不亂按鍵盤，操作人員不得進(jìn)入操作規(guī)程規(guī)定以外的任何程序，不得按規(guī)定以外的任何功能鍵.卸下火花臺板時(shí)要輕拿輕放，防止內(nèi)表面劃傷.取出火花室內(nèi)圓石英墊片和玻璃套管時(shí)務(wù)必謹(jǐn)慎小心，防止操作不當(dāng)致其破碎。
3、壓樣品夾子要垂直，不得在未夾好樣品時(shí)按激發(fā)鍵，不得在激發(fā)時(shí)觸摸或抬起樣品夾.如果遇到激發(fā)時(shí)聲音很大，應(yīng)該按F3鍵停止，不允許直接抬起樣品夾，否則易造成電路板燒毀。
4、激發(fā)樣品后在火花臺內(nèi)產(chǎn)生黑色沉積物可導(dǎo)致電極與火花臺之間短路，所以火花臺應(yīng)定期清理。
5、非崗位人員不得隨便進(jìn)入機(jī)房，機(jī)房內(nèi)禁止吸煙，吃食物。
6、如果遇到突然斷電時(shí)，應(yīng)先關(guān)總，再將其它電源關(guān)閉，等到來電后，按規(guī)程條款進(jìn)行開機(jī)操作。
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