3D XRM用于礦化自組裝絲素/纖維素互穿網(wǎng)絡(luò)氣凝膠的研究和開(kāi)發(fā)
摘要
以生物分子為模板制備控制納米-羥基磷灰石(n-HA)晶體成核和生長(zhǎng)的生物活性材料是骨組織工程的一個(gè)重要研究領(lǐng)域。然而,同時(shí)滿(mǎn)足具有適當(dāng)?shù)谋砻娲植诙取⒏呖紫堵?、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、足夠的機(jī)械強(qiáng)度、生物降解性和生物相容性等性能要求,是制約這些仿生材料在生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)臨床轉(zhuǎn)化領(lǐng)域發(fā)展的核心問(wèn)題。本研究采用溶膠-凝膠冷凍干燥和原位礦化工藝,制備了礦化自組裝絲素蛋白(SF)/纖維素互穿網(wǎng)絡(luò)復(fù)合氣凝膠(M-S-C),探討了SF大分子的表面性質(zhì)和礦化時(shí)間等主要因素對(duì)n-HA自組裝過(guò)程的影響,以及M-S-C在特定條件下性質(zhì)的影響。研究了M-S-C的理化性質(zhì)、形態(tài)、力學(xué)性能、降解行為和體外細(xì)胞毒性等,以評(píng)價(jià)其在骨組織工程中的應(yīng)用前景。M-S-C具有理想的松質(zhì)骨修復(fù)材料所需的微觀結(jié)構(gòu),孔隙率高達(dá)99.2%,熱穩(wěn)定性高,抗壓強(qiáng)度可調(diào)(12.7-22MPa),體外降解速率顯著。此外,M-S-C提取物能顯著促進(jìn)人胚胎腎細(xì)胞增殖。這種礦化互穿聚合物網(wǎng)絡(luò)氣凝膠材料綜合性能優(yōu)異,在骨修復(fù)和再生方面具有潛在的應(yīng)用前景。
2.3.4. M-S-C的形態(tài)和微觀結(jié)構(gòu)
使用Skyscan1273三維X射線顯微成像系統(tǒng)(3D XRM,Bruker, Germany) 以5微米/像素的分辨率測(cè)量氣凝膠,以3D和無(wú)損的方式顯示其內(nèi)部孔隙結(jié)構(gòu)。對(duì)數(shù)據(jù)集進(jìn)行重構(gòu)(NRecon V1.7.4.6, Bruker, Germany) 并生成3D模型(CTvox v3.3.1, Bruker, Germany)。
為了可視化氣凝膠的三維微觀結(jié)構(gòu),進(jìn)行了3D XRM掃描。三維重建圖 (圖9a-d)以及xy (圖9e-h)和xz (圖9i-I)的橫截面清楚地表明氣凝膠結(jié)構(gòu)中存在開(kāi)放和連通的孔隙。這種多孔結(jié)構(gòu)允許細(xì)胞的遷移和增殖,并在骨組織形成中發(fā)揮重要作用。圖9中的所有圖像都使用了相同的顏色表,有機(jī)基質(zhì)和HA兩種分散相分布濃度的變化通過(guò)獲得的圖像的不同灰度值來(lái)表現(xiàn)。M-C和M-S-C中xy和xz的橫截面亮度高于纖維素氣凝膠和SC,這是由于M-C和M-S-C表面存在HA。此外,M-C和M-S-C總體上表現(xiàn)出較高且均勻的亮度,這與M-C和M-S-C在SEM圖像中表現(xiàn)出均勻且高度礦化的形貌相一致 (圖6b和f)。
圖9所示,三維XRM重建 (a) 纖維素氣凝膠, (b) M-C, (c) SC, (d) M-S-C。貫穿氣凝膠中心的2D (e-h) xy和 (i-I) xz切片。(氣凝膠的裂縫是由于分布不均造成的)。
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