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本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本。用純化的試劑抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入它，再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合，形成抗體抗原酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品的濃度。
試劑的使用常識(shí)：
（1）試劑切忌與手接觸（有些試劑有強(qiáng)腐蝕性、等特性）。
（2）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，絕不允許用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，才可取用另一種試劑。
（3）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后請(qǐng)及時(shí)將瓶放回原處，以免遺忘，帶來不便。
（4）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)（怕產(chǎn)生原試劑的再次污染）。
標(biāo)本要求：
1．小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物(Iba-1)ELISA試劑盒不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
需要而未提供的試劑和器材：
37℃恒溫箱
標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
精密移液器及一次性吸頭
蒸餾水
一次性試管
吸水紙
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