無血清凍存液的廠家為您講解細胞凍存步驟和復蘇步驟

來源：廣州宇烽生物科技有限公司 2023年08月16日 09:59

　　無血清細胞凍存液，通用于各種動物細胞株（腫瘤細胞和常規(guī)細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5 年）。該凍存液含 DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分，提高細胞存活率和活力，亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。

　　細胞凍存步驟：

　　1、常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或懸浮細胞于試管中。

　　2、根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數(shù)。

　　3、將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中，1000rmp，5 分鐘離心收集培養(yǎng)細胞沉淀，*棄去離心管中的上清液。

　　4、加入適量的Cell Freezing Medium 細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度約為 5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細胞，制成細胞混合液。

　　5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標記的凍存管中，建議每管 1ml 或 1.5ml。

　　6、直接將分裝好的細胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中，可長期冷凍保存。

　　7、如果想液氮中長期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天時間，方可移至液氮罐中保存。

　　凍存細胞復蘇步驟：

　　從冰箱中取出凍存的細胞，立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。

　　待凍存管中細胞混合液*融化后，立即加入 1ml 細胞培養(yǎng)基于冷凍管中與細胞混合，加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入到細胞沉淀，輕柔地混勻，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)容器中。

　　鏡檢細胞后，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細胞常規(guī)培養(yǎng)。
以上僅供參考，希望對您有所幫助哦！

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