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胎牛血清的內(nèi)毒素含量多少為宜?

來源:廣州宇烽生物科技有限公司   2023年08月16日 09:59  
   胎牛血清是在母牛懷孕3-8個月時,通過胎牛心臟穿刺采血獲得新鮮的胎牛全血,經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細(xì)胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,并在生產(chǎn)過程使用多級高置流膜過濾技術(shù)和三級0.1um終端微濾方法處理而的血清。相比于新生牛和小牛血清,胎牛血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有傷害的成分最少,因此對于一些較“脆弱”的細(xì)胞如干細(xì)胞、原代細(xì)胞,—定要使用優(yōu)質(zhì)的胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng)。胎牛血清的內(nèi)毒素含量多少為宜?
  有下列情況者,對血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選:
  1.養(yǎng)干細(xì)胞時,干細(xì)胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進(jìn)行試用。
  2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時,過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。
  3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實驗,培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒素(最好≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要;
  4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染,或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增,這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實驗順利的第一步。
  5.實驗室有些細(xì)胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)?;蜷L時間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細(xì)胞的毒性影響。
  總之,血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。
  全球細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)會均依據(jù)內(nèi)毒素對血清的品質(zhì)進(jìn)行分級和命名。
  內(nèi)毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎牛血清為例:
  當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;
  當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;
  當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清;
 

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