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色譜配件耗材使用20問!

來源:天津譜祥偉業(yè)科技有限公司   2023年08月25日 09:59  

色譜配件耗材使用20問!

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色譜是我們實(shí)驗(yàn)室的重要一員,色譜耗材雖然很不起眼,但是也同樣起著至關(guān)重要的作用,耗材選的對,維護(hù)的好,才能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定可靠。本文匯總了20個(gè)色譜耗材的常見問題,希望能對大家有所幫助。

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1、氣相色譜中的幾個(gè)概念

氣相色譜:以氣體為流動相,依據(jù)組分與固定相之間分配吸附等作用力的差異而實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品分離的一種分離技術(shù)。分離對象是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定,沸點(diǎn)一般不超過500度的樣品。
氣體:載氣——用于傳送樣品通過整個(gè)系統(tǒng)的氣體。檢測器氣體——某些檢測器所需的支持氣體,如,F(xiàn)ID。
樣品引入:將樣品蒸汽引入載氣的過程。該過程應(yīng)對樣品蒸汽有最小影響。
色譜柱:實(shí)現(xiàn)樣品組分的分離。
檢測器:對流出柱的樣品組分進(jìn)行識別和響應(yīng)。
數(shù)據(jù)采集:將檢測器的信號轉(zhuǎn)換為色譜圖,以備手動或自動定性、定量分析之用。

 

2.氣路中為什么要用氣體捕集阱?GC中常用有哪幾類捕集阱?

GC載氣中的常見的污染物有水分,氧氣,烴類化合物和鹵代烴,其對色譜柱的壽命及被分析物的檢測有很大影響,不良的影響包括:
水分:是色譜柱固定相降解的常見原因;可以損壞儀器;
氧氣:最常見的污染物;是色譜柱固定相降解和進(jìn)樣口襯管性能下降的常見原因;可引起不穩(wěn)定被分析物的分解;
烴類化合物和鹵代烴:通過增加檢測器背景噪音而降低檢測器靈敏度;還可引起基線漂移或波動、污染物色譜峰、噪音或高的基線補(bǔ)償。水分,氧氣,烴類捕集阱是GC中常用的捕集阱。

 

3.不同的檢測器應(yīng)該分別配什么樣的捕集阱?

FID、NPD、FPD-空氣,尾吹氣,氫氣→烴類捕集阱FID、NPD、FPD、TCD-載氣→水分、氧氣捕集阱ECD-尾吹氣→水分和氧氣捕集阱TCD-參比氣→烴類捕集阱MSD-氦氣,甲烷→除水分、氧氣、烴類的組合捕集阱(如,RMSH-2)和氧氣指示捕集阱以上捕集阱建議6-12個(gè)月?lián)Q一次,具體看顧客的使用頻率。

 

4.GC的進(jìn)樣口端涉及的消耗品有哪些?

注射器、進(jìn)樣墊、O型圈、襯管、平流平板(鍍金密封墊)、金屬墊片、石墨密封墊、柱螺母。

 

5.為什么要更換進(jìn)樣隔墊?隔墊有哪些類型?如何根據(jù)客戶需求選擇進(jìn)樣隔墊?

隔墊需定期更換,可防止:漏氣、分解、樣品損失、柱流量或分流流量下降、出鬼峰、柱效下降。不同的隔墊有不同的性能:
流失性與溫度優(yōu)化隔墊(BOT)溫度范圍寬,低流失→適合于質(zhì)譜,進(jìn)樣口最高溫度400度,減少在進(jìn)樣口處的沾粘。
長壽命隔墊預(yù)穿孔,延長使用壽命,減少成核;自動進(jìn)樣優(yōu)選隔墊,適合通宵運(yùn)行;進(jìn)樣達(dá)400次及350度高溫。
高級綠色隔墊壽命長,耐高溫;進(jìn)樣次數(shù)多;降低進(jìn)樣口的粘貼;溫度達(dá)350度。
以上三種隔墊屬高級隔墊,經(jīng)等離子體處理,不沾粘隔墊。
通用型隔墊:溫度350度,次數(shù)達(dá)200次,經(jīng)濟(jì)節(jié)約型。

 

6.如何選擇石墨墊與柱螺母?

首先了解石墨墊的兩種材質(zhì):石墨→材質(zhì)軟,溫度上限高。vespel→由耐高溫的聚酰亞胺制成,材質(zhì)硬,高溫產(chǎn)生流失。
石墨墊與柱螺母:短墊配短帽,長墊配長帽(如,MS接口柱螺帽05988-20066應(yīng)配預(yù)老化的85% vespel,15%石墨墊長墊,通用柱螺帽可配85%vespel,15%石墨墊短墊)石墨墊的選擇(應(yīng)根據(jù)材質(zhì)及色譜柱內(nèi)徑的大?。?,更換頻率一般更換色譜柱、泄漏時(shí)就進(jìn)行更換。

 

7.襯管的作用是什么?什么時(shí)候更換襯管?選擇襯管時(shí)應(yīng)考慮什么因素?

襯管是進(jìn)樣體系的中心元件,樣品在此蒸發(fā)而成氣體。定期更換襯管主要取決于以下情況:對比以前做的譜圖;樣品的潔凈程度;
色譜峰是否出現(xiàn)異?,F(xiàn)象:出現(xiàn)鬼峰、峰形變化、重現(xiàn)性差、樣品高溫分解等。
選擇襯管應(yīng)考慮的因素:進(jìn)樣口類型/進(jìn)樣技術(shù)、襯管體積、襯管處理或去活、特殊性能(石英棉、石英杯、細(xì)徑錐等)。

8.為什么要使用去活化的襯管及玻璃棉?什么物質(zhì)使用去活不帶玻璃棉的襯管?

進(jìn)樣口襯管上的活性點(diǎn)可以吸附樣品組分,引起色譜峰拖尾,損失靈敏度和重現(xiàn)性。當(dāng)不分流進(jìn)樣及分析稍有極性的化合物時(shí),應(yīng)建議用去活化的襯管。使用玻璃棉:A.減少熱歧視,為樣品揮發(fā)提供足夠的表面積B.捕獲非揮發(fā)組分和隔墊碎屑,使其不至于進(jìn)入色譜柱C.擦凈自注射器針頭上的樣品,從而提高了重現(xiàn)性,避免樣品在隔墊上的殘留。使用去活不帶玻璃棉襯管的化合物有:酚類、有機(jī)酸類、農(nóng)藥類、胺類、濫用藥物、反應(yīng)性極性化合物、熱不穩(wěn)定化合物。不分流進(jìn)樣模式:痕量分析、樣品濃度低、流速低、進(jìn)樣量小。分流進(jìn)樣模式:樣品濃度高、流速大、進(jìn)樣量大。

 

9.氟代烴O型圈及石墨O型圈

氟代烴O型圈:不易變形,易更換,多數(shù)情況下使用石墨O型圈:易變形及剝落,進(jìn)樣口溫度高于350度時(shí)使用。更換頻率:二者一般在更換襯管的時(shí)候也同時(shí)更換O型圈

 

10.如何清洗分流平板(鍍金密封墊)

A.在溶劑中超聲清洗,烘干;B.用非氯硅烷化試劑去活化:HMDS(六甲基二硅烷)或BSTFA(N,O雙(三甲基硅烷基))或BSA(N,O-雙(三甲基硅烷基)乙酰胺)或TSIM、TSIM(N-三甲基硅烷咪唑)C.用溶劑清洗,先惰性洗滌——甲苯,再用醇類清洗——甲醇,烘干。

 

11.NPD中白銣珠與黑銣珠有何區(qū)別?

 

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12.NPD,ECD,TCD,FID,FPD分別是什么檢測器,性能特點(diǎn)是什么?

 

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13.色譜柱有哪些柱參數(shù)?如何根據(jù)這些參數(shù)為客戶選擇色譜柱?

色譜柱柱參數(shù):固定相,柱長,內(nèi)徑,膜厚。固定相的選擇:相似相溶原理。非/弱極性柱—常用!中等極性柱—適用于復(fù)雜/困難的分離;強(qiáng)極性柱—多用于特殊應(yīng)用。
柱長:10-15m通常十個(gè)組分以下簡單樣品的快速分析25-30m標(biāo)準(zhǔn)柱長滿足絕大部分應(yīng)用50m,60m,100m復(fù)雜樣品的分析
內(nèi)徑:0.53mm大口徑可替代填充柱能承受較大體積進(jìn)樣,痕量分析0.32mm寬徑,分流/不分流進(jìn)樣,能承受較大體積進(jìn)樣0.25mm窄徑分流進(jìn)樣,GC/MS 應(yīng)用,較高柱效0.18mm微徑較快分離高柱效0.10mm快速GC,快速分離對儀器要求高
膜厚:0.10um薄膜,保留和柱容量低適用于高沸點(diǎn)化合物、組分密集樣品或熱敏化合物0.25~0.50um 標(biāo)準(zhǔn)膜厚應(yīng)用1.0~10.0um 厚膜保留和柱容量高適用于低沸點(diǎn)揮發(fā)性化合物厚膜有利于掩蔽活性位點(diǎn)但高溫下柱流失較大

 

14.色譜柱的溫度極限如60℃240℃/260℃各表示什么?

60℃—溫度下限,低于該溫度使用柱效會降低,但不會損傷色譜柱240℃—恒溫溫度上限,可在此溫度長時(shí)間使用260℃—程序升溫溫度上限,不可超過此溫度,且在此溫度使用不得超過10分鐘

 

15.了解有關(guān)液相色譜柱的幾個(gè)參數(shù)及安捷倫色譜柱的分類和應(yīng)用范圍

表面積——顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/gram表示;高表面積對于多組份樣品的分離具有較強(qiáng)的保留能力,柱容量和分離度;表面積低的填料通常能迅速達(dá)到平衡狀態(tài),對于梯度淋洗尤為重要
孔徑——顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍60-10,000?大孔的填料顆粒可以延長溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時(shí)間,達(dá)到充分分離,改善峰形;樣品MW≤4000,選擇80?的孔徑,樣品MW>4000選擇300?的孔徑碳覆蓋率——對色譜分離的影響,與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。高碳覆蓋率:提高分辨率,分析時(shí)間長;低碳覆蓋率:縮短運(yùn)行時(shí)間
封端/封尾——對色譜分離的影響,使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基(二次鍵合)封端:減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象
對于極性樣品,未封端與經(jīng)過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異
粒徑——1.8um3.5um→快速分離5um→行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)7um→制備柱

 

16.如何沖洗液相色譜柱?

對于反相色譜柱的沖洗:用以下溶劑至少各25mL沖洗色譜柱(分析柱)不含緩沖鹽的流動相100%甲醇100%乙腈75%乙腈+25%異丙醇100%異丙醇100%二lv甲烷100%己烷
*若使用己烷或二lv甲烷沖洗色譜柱,則在重新使用反相流動相以前,必須用異丙醇沖洗色譜柱?。?!
對于正相色譜柱的沖洗:用以下溶劑至少各50mL沖洗色譜柱(分析柱)50%甲醇+50%三lv甲烷100%乙酸乙酯

 

17.如何對氣相色譜柱進(jìn)行老化?

安裝色譜柱后,首先用至少3倍于平常工作流速的載氣吹色譜柱, 然后將載氣流速調(diào)整到正常流速,開始從100度升溫迅速升溫到老化溫度,老化色譜柱。
老化溫度——在高于樣品分析終溫20度但不超過色譜柱的恒溫溫度上限的狀態(tài)下,恒溫2小時(shí)的方法快速老化一支新的毛細(xì)管色譜柱,色譜柱老化時(shí)的升溫速率沒有限制,即可使用最高升溫速率老化色譜柱。

 

18.液相色譜儀有哪些重要組成部分?液相有哪些檢測器?

脫氣機(jī)、泵、柱溫箱、自動進(jìn)樣器、檢測器。檢測器有:VWD 可變波長紫外檢測器、DAD二極管陣列檢測器、MWD多波長檢測器、RID、示差折光檢測器、FLD熒光檢測器。

 

19.如何選擇溶劑入口過濾頭?

用于常規(guī)和毛細(xì)液相的溶劑過濾頭有:玻璃過濾頭20μm孔徑,PTFE連接頭5mm/3.2mm,不銹鋼過濾頭12-14μm孔徑
用于制備液相的溶劑過濾頭有:玻璃過濾頭40μm孔徑,PTFE 連接頭7mm/4mm
若流動相涉及以下溶劑,應(yīng)避免使用不銹鋼過濾頭:碘化鋰,高濃度的硝酸及硫酸,在有機(jī)溶劑中的有機(jī)酸溶液,如甲醇中1%乙酸會腐蝕不銹鋼,四氯化碳和異丙醇或THF混合液等。
日常對玻璃濾芯的清洗可用35%的硝酸浸泡1小時(shí)(不用超聲波清洗,會引起破裂)。

 

20.流通池的選擇指南

毛細(xì)管液相色譜柱(內(nèi)徑0.3或0.5mm)500nL流通池;微徑或溶劑節(jié)省型液相色譜柱(內(nèi)徑1.0或2.1mm)半流通池;傳統(tǒng)液相色譜柱(內(nèi)徑3.0或4.6mm)標(biāo)準(zhǔn)流通池反壓高于100bar,高壓流通池形;樣品MW≤4000,選擇80?的孔徑,樣品MW>4000選擇300?的孔徑;
碳覆蓋率——對色譜分離的影響,與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。高碳覆蓋率:提高分辨率,分析時(shí)間長;低碳覆蓋率:縮短運(yùn)行時(shí)間對色譜分離的影響,使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基(二次鍵合)封端:減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象對于極性樣品,未封端與經(jīng)過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異粒徑:1.8um3.5um→快速分離5um→行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)7um→制備柱

 


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