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影響HPLC色譜柱柱效的因素有哪些?

來(lái)源:廣州太瑋生物科技有限公司   2023年08月28日 10:37  
HPLC色譜柱是設(shè)計(jì)用于為 HPLC 和 UHPLC 應(yīng)用提供可靠且可重現(xiàn)結(jié)果的色譜柱。產(chǎn)品在多種相中操作,有多種固定相和色譜柱尺寸可供選擇。包括分析、防護(hù)、阱和制備色譜柱。
 
色譜柱的柱效是非常重要的指標(biāo),一般都取決于固定相的性能和裝柱技術(shù)。一般HPLC的色譜柱固定相(填料)大致有三種:硅膠或以硅膠為基質(zhì)質(zhì)的填料、聚合物填料和無(wú)機(jī)物填料。正相色譜柱大多采用硅膠類填料,反相色譜柱則多采用以硅膠為基質(zhì)組成的官能團(tuán)類的填料。以聚合物為填料的色譜柱最大的特點(diǎn)是pH在1~14都能用;疏水性強(qiáng)。但無(wú)機(jī)填料色譜柱一般只是限于特殊用途,比較少用。
 
因?yàn)镠PLC的樣品都為溶液,而溶液受溫度影響很大。例如:溫度對(duì)溶劑的溶解能力、色譜柱的柱效、流動(dòng)相的黏度都會(huì)產(chǎn)生影響;如果溫度升高,可能會(huì)提高溶液在流動(dòng)相中的溶解度,可以降低分配系數(shù)K;降低流動(dòng)相黏度可以降低柱壓,有利于保護(hù)色譜柱,延長(zhǎng)色譜柱的壽命。但是,溫度不能太高,否則會(huì)產(chǎn)生氣泡。
 
HPLC工作者還必須注意不同的溫度,對(duì)色譜柱的保留時(shí)間、分離效果會(huì)有影響;對(duì)檢測(cè)器的靈敏度也會(huì)有影響。特別是對(duì)示差折光器的靈敏度、最小檢出限的影響很大。所以,很多HPLC特別注意對(duì)恒溫系統(tǒng)的設(shè)計(jì)。這些都是HPLC設(shè)計(jì)者、使用者應(yīng)該重視的問(wèn)題。

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