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固相萃取儀實驗過程中遇到的問題及解決方法

來源:上??普苌萍加邢薰?nbsp;  2023年12月04日 13:36  
  固相萃取儀將固相萃取的各個步驟有效的集成于一個平臺,可實現(xiàn)整個固相萃取過程(活化、上樣、淋洗、干燥、洗脫)的全自動操作,大大提高了樣品前處理的效率,將分析工作者從繁瑣的前處理工作中解脫出來,使樣品前處理更快捷、高效。
 
  固相萃取儀實驗過程中遇到的問題及解決方法:
 
  1、篩板堵塞
 
  常見的固相萃取柱通常由柱管、篩板和填料3部分組成,其中篩板是一種具有多孔結(jié)構(gòu)的材料,起到固定填料和過濾溶液的作用。
 
  當(dāng)上樣液中含有較多顆粒雜質(zhì)時,這些顆粒雜質(zhì)會在篩板上不斷聚集,在篩板上端形成一層顆粒層,隨著壓力的增加以及時間的延長,顆粒層會越來越嚴(yán)實,最終導(dǎo)致篩板堵死,溶液無法通過固相萃取柱。
 
  遇到這種情況,可以在上樣前先高速離心或者過濾,然后取上清液或者濾液過固相萃取柱,減少顆粒雜質(zhì)的影響。
 
  2、流速緩慢
 
  固相萃取過程中流速不能太快,流速太快不利于目標(biāo)化合物在填料上的保留以及溶劑與目標(biāo)化合物或者填料的相互作用,從而影響保留或者洗脫過程。當(dāng)然流速也不能太慢,否則會大大延長前處理的時間。
 
  原因:
 
  2.1樣品粘度高,例如食品中遇到濃縮汁、糖果時,需要對樣品充分稀釋,降低上樣液的濃度;
 
  2.2填料較多或者太緊密,此時需要增強(qiáng)負(fù)壓或者減少填料的使用量;
 
  2.3溶劑極性不匹配,例如SN/T1924-2011中淋洗固相萃取柱時,先用水、甲醇,接著用正己烷淋洗,正己烷與前兩者的極性不同,從而導(dǎo)致流速很慢,遇到這種情況,可以增加負(fù)壓或者選用合適的溶劑進(jìn)行過渡。
 
  3、凈化效果不理想
 
  通常固相萃取柱有兩種凈化模式,一種是采用保留目標(biāo)化合物的模式,另一種是采用保留雜質(zhì)的模式,不管采用哪種模式都需要選擇合適的填料,使得目標(biāo)化合物或者雜質(zhì)能吸附在填料中,同時不需要保留的組分盡可能多的隨著溶劑一同流出固相萃取柱。
 
  在保留化合物模式下凈化樣品時,通常會經(jīng)歷上樣、淋洗和洗脫三個步驟。淋洗和洗脫溶劑選擇的不合適也會使得凈化效果不理想。
 
  4、重現(xiàn)性差
 
  固相萃取中重現(xiàn)性差通常與產(chǎn)品質(zhì)量、流速以及操作有關(guān)。固相萃取柱中填料的質(zhì)量、均勻性和松緊度都可能影響到方法的重現(xiàn)性,因此選擇質(zhì)量可靠的廠家很重要,遇到重現(xiàn)性差的實驗,可以選擇用標(biāo)準(zhǔn)溶液考察一下固相萃取柱的重現(xiàn)性。
 
  固相萃取過程中流速的快慢也是影響重現(xiàn)性的重要因素之一,上樣、淋洗、洗脫過程中適當(dāng)降低流速,通常而言,流速低于5mL/min時結(jié)果較為穩(wěn)定,有些實驗可能需要更慢的流速。當(dāng)然,操作者水平的高低也會影響到結(jié)果的重現(xiàn)性。
 
  5、回收率不理想
 
  在實驗中,操作者關(guān)注較多的可能也是關(guān)于加標(biāo)回收率的問題,固相萃取柱質(zhì)量的優(yōu)劣、固相萃取方法是否合適、操作者操作技能的高低都可以通過加標(biāo)回收實驗進(jìn)行驗證。原則上加標(biāo)回收率應(yīng)在80%~120%之間,當(dāng)然對于多組分目標(biāo)物同時檢測時,這一指標(biāo)可適當(dāng)放寬。

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