實驗目的:生物懸濁液狀態(tài)的樣品是如何獲得高質(zhì)量的樣品均質(zhì)效果?此次實驗所選擇處理的樣品為大腸桿菌和酵母菌,選用上海凈信的高壓均質(zhì)機JXNANO-15為此次的實驗均質(zhì)設備。
高壓均質(zhì)機也稱為高壓流體納米勻質(zhì)機,它可以使懸濁液狀態(tài)的物料在超高壓作用下,高速流過具有特殊結構的均質(zhì)閥,使物料發(fā)生物理結構性質(zhì)等一系列變化,最終達到均質(zhì)的效果。
實驗操作步驟:
01.使用2根膠管將冷水機的進出水口和主機出料冷卻器連接。
02.冷水機加水,打開冷水機進行預冷。
03.冷水機達到預設溫度后,確保壓力閥門處于松弛的狀態(tài)下,打開電源開關。
04.進料口處(料斗)先加入適量的水,排除管道內(nèi)的空氣。
05.等待進料杯水快進入完進料口時,把大腸桿菌樣品倒入進樣杯,將壓力調(diào)至1000bar(100mpa)進行均質(zhì)破碎。
06.均質(zhì)后將樣品接入干凈的容器中。
07.處理完樣品后,先卸壓,將泵體內(nèi)殘留液排盡。
08.再加入清水,進行清洗。
09.清洗后,同上操作,水快流入完加樣孔時,加入100ml的酵母菌,調(diào)節(jié)壓力1200bar~1600bar(120mpa~160mpa),進行均質(zhì),重復三遍,得到均質(zhì)樣品。卸壓排盡樣品后,加入清水清洗。
10.加料杯中留水進行封存,防止微量殘留樣品結塊,堵塞閥門。
樣品均質(zhì)處理的實驗效果:
實驗操作應用的注意事項:
1、嚴禁在無物料的情況下帶壓空運行。
2、設備運行過程中,進料要求穩(wěn)定、均一、且不可間斷。
3、使用時應盡量避免泵體內(nèi)吸入空氣。
4、使用結束后,加料杯和泵體內(nèi)應留有液體進行封存。
高壓均質(zhì)機是使懸浮液或乳化液體系中分散物微?;?、均勻化的處理過程,這種處理同時起降低分散物尺度和提高分散物分布均勻的作用。實驗均質(zhì)設備被廣泛應用于工業(yè)領域、生命科學行業(yè)以及生物技術和制藥領域的研究中;它可使用不同的方法從大腸桿菌細胞中制備細胞裂解液,使用高壓均質(zhì)機,進行破壁,方法簡單,成本低,處理量大,適用于工業(yè)化生產(chǎn),能較好地保存營養(yǎng)成分。
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