植物活體轉(zhuǎn)化系統(tǒng)是一類生物技術(shù)設(shè)備,用于將植物活體組織轉(zhuǎn)化為細(xì)胞、組織或器官等。
植物轉(zhuǎn)化,是指利用重組DNA技術(shù)、細(xì)胞組織培養(yǎng)技術(shù)或種質(zhì)系統(tǒng)轉(zhuǎn)化等技術(shù),將外源基因?qū)胫参锛?xì)胞或組織中,并使之在受體細(xì)胞中得以充分表達(dá),獲得使外源基因穩(wěn)定表達(dá)的可育植株的過(guò)程。
植物轉(zhuǎn)化技術(shù)分為直接基因轉(zhuǎn)移和生物介導(dǎo)轉(zhuǎn)化兩大類技術(shù)。植物遺傳轉(zhuǎn)化是應(yīng)用重組DNA技術(shù)、細(xì)胞組織培養(yǎng) 技術(shù)或種質(zhì)系統(tǒng)轉(zhuǎn)化技術(shù),有目的地將外源基因或DNA片段插入到受體植物基因組中并通過(guò)減數(shù)分裂獲得新植株的技術(shù)。
方法:
(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。農(nóng)桿菌是土壤中的一種微生物,在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物,對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力。
(2)花粉管通道法:在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在開(kāi)花、受精過(guò)程中形成的花粉管通道,將外源DNA導(dǎo)入受精卵細(xì)胞。
(3)基因槍法:通過(guò)動(dòng)力系統(tǒng)將帶有基因的金屬顆粒(金?;蜴u粒),將DNA吸附在表面,以一定的速度射進(jìn)植物細(xì)胞,由于小顆粒穿透力強(qiáng),故不需除去細(xì)胞壁和細(xì)胞膜而進(jìn)入基因組,從而實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的目的。
(4)導(dǎo)入微生物受體細(xì)胞感受態(tài)法:先用Ca離子處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞為感受態(tài)細(xì)胞,后將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中,在一定溫度下促使感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子。
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