培養(yǎng)基除菌過濾裝置是在生命科學實驗室中被廣泛使用的一款基礎設備。其主要作用是對配置的培養(yǎng)基進行除菌和除雜質(zhì)的過濾,以便后續(xù)用于細胞培養(yǎng)。下面我們以Sciencetool圣斯特品牌一款R300-500型號為例,來說明該儀器的結(jié)構(gòu)組成、工作原理和具體使用方法。
培養(yǎng)基除菌過濾裝置R300-500構(gòu)造和組件主要包括以下部分:1臺產(chǎn)生負壓吸力的無油真空抽濾泵;1組帶有真空表的真空調(diào)節(jié)閥,可以用觀察過濾系統(tǒng)內(nèi)的工作狀態(tài),并根據(jù)實際需要調(diào)節(jié)吸力和過濾速度;內(nèi)置阻塵濾芯的緩沖杯,可以阻擋倒吸的液體和異物直接抽入真空泵內(nèi),防止進水和異物造成的意外損壞;1組瓶頂式的真空過濾瓶,該過濾瓶由濾杯、過濾連接座和藍蓋試劑瓶組成,濾杯盛放待過濾的培養(yǎng)基,濾膜鋪放在過濾連接座上方的濾膜支撐片上,連接座下部的GL45螺紋可以和藍蓋試劑瓶連接;另有一個帶有防倒吸進液阻水保護器的泵管用于連接過濾瓶和抽濾泵。
具體的過濾原理如下:在過濾前,用戶將過濾膜裝入濾瓶組內(nèi),并進行高溫高壓濕熱滅菌(一般建議121度30分鐘)。隨后在生物安全柜或者超凈工作臺內(nèi)取出瓶組。液體倒入過濾杯后打開抽濾泵。抽濾泵將藍蓋試劑瓶內(nèi)空氣抽走,使得濾器內(nèi)外形成壓力差,外部大氣壓便可推動培養(yǎng)基通過濾膜。細菌、微生物、雜質(zhì)等需要被去除的物質(zhì)被截留在濾膜的表面,從而達到過濾效果。通過濾膜的培養(yǎng)基流入試劑瓶內(nèi)被保存。
具體的使用方法主要有以下這些步驟:
1.根據(jù)實驗要求預先清洗好過濾瓶,如有滅菌要求,除抽濾泵外,過濾瓶組和泵管套件,都可以進行121高溫高壓滅菌30分鐘。滅菌時請將過濾膜預先裝好在過濾漏斗內(nèi)。
2.根據(jù)圖示,將濾膜平整的鋪放在黑色濾膜支撐片上,本型號需要使用直徑φ47或50mm的濾膜(材質(zhì)不限,孔徑不限);濾膜鋪好后,將濾杯輕輕放在濾膜表面,并順時針旋轉(zhuǎn)卡緊濾杯。
3.滅菌后務必烘干,烘干溫度不要超過60度,且烘干時間建議在30分鐘內(nèi),烘干后后盡快拿出,不要長時間保存在烘箱內(nèi),會造成塑料件變形。
4.將試劑瓶放置在水平臺面上。
5.將過濾連接座擰在試劑瓶螺紋口上,感覺有阻力即可,不要擰死容易造成螺紋的滑絲
6.使用帶阻水保護器的泵管連接抽濾泵和過濾瓶組,阻水保護器一側(cè)印有“此面朝泵”,請按照文字示意將該面朝向抽濾泵。
7.將濾液倒入濾杯內(nèi),準備開始過濾。
接通電源,打開真空泵上面的電源開關,真空泵啟動。
8.過濾過程中,可通過真空調(diào)節(jié)閥來調(diào)節(jié)吸力和抽濾速度,調(diào)節(jié)閥左右旋轉(zhuǎn)即可。
9.工作結(jié)束后,先使用調(diào)節(jié)閥泄壓,然后再關機,這樣可以避免氣壓拍打濾液表面濺入泵管內(nèi)。
10.當感覺設備缺乏吸力、抽濾速度過慢、無法抽吸,或有時可以吸有時又無法吸時(這是由于倒吸的液體可能在環(huán)境因素影響下蒸發(fā)掉一部分),一般是濾器被倒吸的液體堵塞,需要及時更換。此時可以先判斷是否是過濾堵塞,如果連接過濾瓶時,或者拔掉真空泵的泵管用手堵住泵管接口,真空泵仍有壓力(指針不低于600mmHg),表示主機正常工作,為阻水保護器堵塞,需要及時更換。
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