實驗目的:本次實驗需要樣品蛋白純化,實驗要求需除去樣品中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度;故此次實驗室選用凈信科研者系列的冷凍真空冷凍離心濃縮儀JX-ZLN-B來對樣品組織進行低溫濃縮,以便在保護樣品的同時獲得優(yōu)質的樣品效果。
實驗設備:冷凍真空冷凍離心濃縮儀(JX-ZLN-B)
樣品蛋白純化離心濃縮實驗操作過程:
1、在實驗開始前,我們需要提前將實驗所需的儀器設備,實驗耗材以及樣品組織等準備好
2、在實驗開始前,需對儀器設備所需的冷阱溫度-65℃進行設置,點擊儀器設備的制冷按鈕,對儀器設備進行提前預冷操作
3、在儀器設備的參數(shù)設置處,需按樣品的實驗要求對其依次進行程序參數(shù)的設置:速度、時間和溫度;選定實驗所需要的程序,點擊溫度設置開始提前加熱
4、待主機的預熱溫度和冷阱預冷溫度都達到所設置的程序參數(shù)后,即可將已經配置好的10ml樣品放置在離心濃縮儀設備中進行配比;要注意管口為開口狀態(tài),點擊START開始運行
5、在儀器設備的運行過程中,可用頻閃儀對其溶液離心濃縮的情況進行觀察,可實時控制樣品實驗的進度
6、在儀器設備運行結束時,轉子停止運行后,蜂鳴器發(fā)出提示音后,此時便可取出離心管,獲取到所需濃縮后的樣品效果了
7、關閉冷阱,開始除霜回收冷阱中的溶劑。
樣品蛋白純化離心濃縮前后實驗效果圖:
冷凍真空離心濃縮儀對蛋白純化離心濃縮的實驗效果由上圖可看出,低溫純化離心濃縮樣品,可使樣品更安全。蛋白質是包括人類在內的各種生物有機體的重要組成成分,是生命的物質基礎之一;而研究蛋白質首要的步驟是將目的蛋白從復雜的大分子混合物中分離純化出來,得到高純度具有生物學活性的目的物。因此,高效的純化技術和手段是蛋白質研究的重要基礎和關鍵之一。
需要蛋白純化,要求除去其中混有的PBS緩沖液,以提高蛋白的濃度。蛋白純化需要獲得高純度、活性和產量的蛋白質。冷凍真空離心濃縮儀采用離心力、真空和加熱相結合的方法使樣品中的溶劑快速蒸發(fā),從而達到濃縮樣品的目的。低溫濃縮,使樣品更安全。廣泛應用于蛋白和分子結構實驗室。
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