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ACQUITY UPLC M-Class,質(zhì)譜靈敏度提升好幫手!

來源:上海硅儀生化科技有限公司   2024年04月24日 10:49  

導(dǎo)語:2004年沃特世推出了UPLC技術(shù),這一技術(shù)基于小粒徑的分析方法,為使用者帶來了更高的分析效率和更好的數(shù)據(jù)質(zhì)量。二十載光陰流轉(zhuǎn),我們見證了這一技術(shù)從誕生到發(fā)展,再到如今革新的輝煌歷程。作為液相色譜領(lǐng)域的創(chuàng)新者,沃特世始終致力于推動技術(shù)的進(jìn)步,堅(jiān)持以用戶需求為導(dǎo)向,不斷追求更高的分析精度和可靠性。值此UPLC二十周年之際,謹(jǐn)以此推文向UPLC系列產(chǎn)品致敬,敬請期待新品上市。


生物分離分析領(lǐng)域的分析科學(xué)家經(jīng)常面臨多種挑戰(zhàn),如對復(fù)雜樣品中低豐度的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定和定量。由于生物樣品數(shù)量有限,基質(zhì)干擾強(qiáng)烈,為了在有限條件下實(shí)現(xiàn)更高靈敏度的分析,分析科學(xué)家們通常通過提高質(zhì)譜儀的靈敏度、使用更細(xì)內(nèi)徑的色譜柱、改造LC系統(tǒng)來改善LC/MS分析表現(xiàn)。常規(guī)LC系統(tǒng)改造策略,如進(jìn)行管路改造或分流,雖然解決了LC系統(tǒng)的管路內(nèi)徑較大易導(dǎo)致樣品擴(kuò)散損失的問題,但往往會導(dǎo)致結(jié)果的重現(xiàn)性差,儀器性能不穩(wěn)定,從而影響了分析的準(zhǔn)確性和可靠性。為了解決以上難題,沃特世于2014年推出ACQUITY UPLC M-Class液相系統(tǒng),致力于為分析科學(xué)家提供高靈敏、更可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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圖1. ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)。


作為涵蓋納升級至微升級流速范圍的UltraPerformance LC(UPLC)超高效液相色譜系統(tǒng),ACQUITY UPLC M-Class不僅提供了優(yōu)異的UPLC分離性能,還兼容不同規(guī)格的色譜柱,流速范圍200 nL/min~100 μL/min,可靈活配置HDX技術(shù)、2D色譜和紫外檢測器,適用于不同領(lǐng)域的各類應(yīng)用。作為質(zhì)譜儀的前端接口,該系統(tǒng)與高分辨質(zhì)譜聯(lián)用,能夠?qū)?fù)雜樣品進(jìn)行深度分析表征和研究;而與四極桿質(zhì)譜聯(lián)用,則適用于多肽、代謝物的定量分析或其他靶向性分析工作,如生物標(biāo)記物的驗(yàn)證等,其出色的靈敏度滿足了日益增長的分析需求,為科學(xué)家們解決復(fù)雜的分析難題提供了有力支持。

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圖2. 采用ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)的HDX-高分辨質(zhì)譜儀平臺。


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圖3. 左圖顯示了在線胃蛋白酶消化后鈣調(diào)蛋白肽段的色譜分離圖。右圖顯示了從10秒到240分鐘標(biāo)記的肽段(ADIDGDGQVNY)的質(zhì)譜結(jié)果。隨著在D2O中暴露時(shí)間延長,m/z值會隨之增加。


采用ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)的HDX平臺可充分利用UPLC的分離能力,與高分辨質(zhì)譜聯(lián)用實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)構(gòu)象的細(xì)微變化進(jìn)行定量分析。HDX數(shù)據(jù)有助于監(jiān)測蛋白質(zhì)構(gòu)象,定位結(jié)合位點(diǎn)和構(gòu)象變化區(qū)域,為候選藥物與靶蛋白的結(jié)合、生物制藥產(chǎn)品開發(fā)、蛋白質(zhì)間相互作用等研究提供信息。

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圖4. ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)與串聯(lián)四極桿聯(lián)用。


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圖5. ionKey/MS系統(tǒng)iKey HSS T3, 100?, 1.8 µm, 150 µm×100 mm與ACQUITY UPLC 2.1 mm內(nèi)徑色譜柱結(jié)果對比。與ACQUITY UPLC 2.1 mm內(nèi)徑色譜柱相比,當(dāng)注入相同體積時(shí),使用ionKey/MS系統(tǒng)能夠使mafei的檢測靈敏度提高9倍。


微流級ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)與使用ionKey技術(shù)的串聯(lián)四極桿聯(lián)用,有效提高了電噴霧質(zhì)譜的電離效率,節(jié)約了流動相溶劑和樣品的制備成本,相比于常規(guī)的分析級LC-MS平臺能夠顯著提高生物制藥相關(guān)分析物(如肽、抗體、寡核苷酸)定量的靈敏度。


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ACQUITY UPLC M-Class



發(fā)揮優(yōu)異性能,為數(shù)據(jù)保駕護(hù)航

  • 穩(wěn)定性:低系統(tǒng)體積和流路設(shè)計(jì),結(jié)合直流自動溶劑流量控制算法大減少了色譜分離過程中地?cái)U(kuò)散和由于吸附而造成的樣品損失,從而保證了分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
  • 靈敏分析:內(nèi)部流路全惰性系統(tǒng)材質(zhì)和專為微升級分離而優(yōu)化設(shè)計(jì)的新型微升級ESI質(zhì)譜噴針、低擴(kuò)散流通池等,顯著提高目標(biāo)物的回收率,保持峰容量,保證了光學(xué)檢測的高分離度和靈敏度。

  • 出色分離度:沃特世還推出了專為低擴(kuò)散納流液相色譜系統(tǒng)而設(shè)計(jì)Waters nanoEase M/Z納流和微流LC-MS色譜柱,通過ZenFit連接技術(shù)改善由連接變化引起的色譜表現(xiàn)不一致情況。這些分析柱充分利用了固定相亞2 µm顆粒技術(shù)的分離能力,適用于復(fù)雜肽和蛋白質(zhì)納升級、毛細(xì)管級和微升級UPLC分離。


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圖6. 具有ZenFit連接技術(shù),適用于納升級到微升級LC-MS分析的沃特世色譜柱。


十年來,穩(wěn)定可靠的納升至微升級ACQUITY UPLC M-Class分離系統(tǒng)以其性能和應(yīng)用領(lǐng)域,為生物分離分析領(lǐng)域的研究人員提供了強(qiáng)大的支持,在蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝分析、代謝物鑒定和藥代動力學(xué)研究等領(lǐng)域均有廣泛應(yīng)用。


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