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細(xì)胞耗氧率OCR的檢測(cè)

來(lái)源:上海貝博生物科技有限公司   2024年05月09日 14:42  

耗氧量分析是研究代謝的有用工具。耗氧量測(cè)量結(jié)果是細(xì)胞代謝功能,更具體而言是線粒體功能的關(guān)鍵性指示。通過(guò)這類指標(biāo)來(lái)探究活細(xì)胞代謝,可為細(xì)胞功能以及代謝變化在疾病進(jìn)展中的作用提供深入洞察。

線粒體功能對(duì)細(xì)胞代謝、存活和能量產(chǎn)生至關(guān)重要。線粒體呼吸受損與病理狀態(tài)(如癌癥、缺血性再灌注損傷和神經(jīng)退行性疾?。┯嘘P(guān)。線粒體毒性也是安全相關(guān)的抗藥性和藥物戒斷癥狀的常見原因。

BBoxiProbe® R01耗氧率分析OCR(BB-48211)可以實(shí)時(shí)測(cè)量全細(xì)胞或分離線粒體的耗氧量,是以高通量形式來(lái)評(píng)估用于代謝表征的細(xì)胞呼吸以及評(píng)估治療對(duì)線粒體功能毒性作用的一種可靠方法。

它可以使用熒光酶標(biāo)儀在標(biāo)準(zhǔn)微孔板上進(jìn)行有氧代謝的簡(jiǎn)單動(dòng)力學(xué)測(cè)定。隨著呼吸作用的進(jìn)行,溶解氧被消耗,樣品中的氧氣濃度降低,導(dǎo)致 BBoxiProbe® R01 分析的信號(hào)增加,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)耗氧量的測(cè)定。

BBoxiProbe® R01是氧氣敏感的熒光探針,最大激發(fā)波長(zhǎng)為 455 nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為 603 nm。其熒光通過(guò)分子碰撞與氧氣反應(yīng),由O2淬滅,在無(wú)氧條件下熒光強(qiáng)度更高,反之有氧條件下熒光強(qiáng)度變低,因此熒光信號(hào)的量與樣品中細(xì)胞外O2的量成反比,從而BBoxiProbe® R01可被用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞外氧氣消耗的變化。在測(cè)定中,耗氧率由熒光信號(hào)隨時(shí)間的變化計(jì)算。細(xì)胞耗氧量增加,熒光信號(hào)的變化率增加;反之,耗氧量減少,熒光信號(hào)的變化率降低。

BBoxiProbe® R01與O2的這種反應(yīng)是非破壞性且可逆的,BBoxiProbe® R01沒(méi)有細(xì)胞毒性,其是化學(xué)穩(wěn)定的,惰性的,水溶性的和細(xì)胞不滲透的,不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜。因此還可以同時(shí)與糖酵解, 線粒體膜電位JC-1, ROS和細(xì)胞ATP 、LDH等檢測(cè)的試劑結(jié)合使用,進(jìn)行多參數(shù)檢測(cè)。

用BBoxiProbe® R01進(jìn)行細(xì)胞外耗氧檢測(cè)方法及其簡(jiǎn)單,不需要適用特殊的儀器設(shè)備,只需要熒光酶標(biāo)儀之類的熒光讀板設(shè)備即可。


BBoxiProbe® R01采用可見光激發(fā)檢測(cè),相對(duì)于采用紫外光激發(fā)的檢測(cè)試劑,細(xì)胞損傷更低,對(duì)細(xì)胞的毒害更小。結(jié)果更加準(zhǔn)確客觀。



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