在培養(yǎng)貼壁細胞的時候，偶爾會出現(xiàn)細胞接種后貼壁不均勻的情況。有的地方長得非常密集，有的地方卻太稀疏。雖然這對于常規(guī)培養(yǎng)并不算大問題，但有時則可能影響后續(xù)的實驗進程。

所以一旦遇到貼壁不勻，建議排查原因并優(yōu)化操作方案。

本文中，小尚將細胞貼壁不均勻總結歸納為四種情況：

1. 局部生長密集，密集處呈不規(guī)則分布

l 原因：一般是接種時沒有混勻，或者細胞傳代時沒有消化徹di從而形成細胞團塊導致的

l 解決方案：繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，重新消化接種，接種時注意使用十字法或8字法混勻，接種后顯微鏡下確認細胞是否分散為單個細胞。

2. 培養(yǎng)器皿中央生長密集，邊緣稀疏

l 原因：十字法或8字法混勻時搖晃次數(shù)過多，液體形成漩渦所導致

l 解決方案：繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，待細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，重新消化接種。在混勻時搖晃5-6次即可。

3. 細胞在培養(yǎng)器皿的半邊生長，形成明顯分界線

l 原因： 這可能是培養(yǎng)箱架子不平造成的

l 解決方案：可通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱架子以保持水平解決。

4. 細胞形成同心圓，并靠邊緣生長

l 原因：這是由于培養(yǎng)箱風扇故障或設備震動導致

l 解決方案：在培養(yǎng)器皿下面墊泡沫板或在架子上放重物可以有所緩解，檢查培養(yǎng)箱風扇是否正常運轉。

總之，細胞貼壁不均勻可能是多種因素造成的，對于前兩種情況，一般是傳代操作造成的，重新接種即可解決；而后兩種情況是硬件設施造成的，則需要調(diào)試設備。

同學們?nèi)绻杏龅狡渌N壁不均勻的情況，可以在下方評論區(qū)留言哦。