通用細(xì)胞凍存液的使用步驟:
1、培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)晚期,顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無污染等,取狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作。
2、離心,棄上清。
3、加入適量的通用細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1~10×106/ml,置于凍存管中,密閉、不要擰的太緊,避免彎曲變形。
4、一般遵循1℃/min的速率進(jìn)行冷凍。亦可采用4℃ 20min,-20℃ 30min,-70℃過夜,然后置于液氮罐中長(zhǎng)期存儲(chǔ)。
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