在現(xiàn)代生物科學和生物技術領域，移液器在實驗室中的重要性不言而喻。移液器幾乎出現(xiàn)在每一個實驗環(huán)節(jié)中，從樣品處理到檢測分析，其精準性對科研成果至關重要。移液器的準確性直接影響實驗數(shù)據(jù)的可靠性和重現(xiàn)性，因此在科學研究中占據(jù)了核心地位。本文將詳細介紹移液器的發(fā)展歷史、分類、工作原理及其在特殊應用中的優(yōu)勢，旨在幫助研究人員更好地理解和使用這一重要工具。

移液器的發(fā)展歷史

移液器的發(fā)展始于1958年，當時Heinrich Schnitger先生獲得了一項名為“快速準確移取微量體積液體的移液器”。Eppendorf公司基于這一發(fā)明，于1961年推出了第一支工業(yè)化的氣體活塞式移液器。這一創(chuàng)新改變了當時依靠嘴吸取液體的方式。Eppendorf的第一款移液器具備彈性吸嘴和可拆卸的塑料吸頭，與現(xiàn)代實驗室使用的移液器非常相似。

自1961年推出第一款“Marburg移液器”后，Eppendorf公司不斷改進和發(fā)展活塞沖程移液器，推出了多種類型和功能的移液器，以滿足不同實驗需求。

移液器的分類及工作原理

移液器按工作原理可分為氣體活塞式移液器和外置活塞式移液器。

氣體活塞式移液器 (Air-cushion)

氣體活塞式移液器通過彈簧的伸縮運動，推動活塞排除部分空氣，再利用大氣壓吸入液體，最后由活塞推動空氣將液體排出。液體和活塞之間有空氣柱。這種設計適用于常規(guī)水性溶液，廣泛應用于大多數(shù)生物實驗中。

這種類型的移液器的工作步驟如下：

1. 吸液：按下活塞按鈕，活塞向上移動，形成負壓，吸入液體。

2. 放液：松開活塞按鈕，活塞向下移動，推動空氣，將液體排出。

氣體活塞式移液器的優(yōu)點在于其結構簡單、操作便捷，適合大多數(shù)常規(guī)實驗。

外置活塞式移液器 (Positive-displacement)

外置活塞式移液器的原理是通過分液管或吸頭內活塞的連續(xù)運動移取和打出液體。由于活塞與液體直接接觸，沒有空氣柱，因此適用于高粘度、易揮發(fā)、易起泡等特殊液體。

這種類型的移液器的工作步驟如下：

1. 吸液：活塞與液體直接接觸，形成負壓，吸入液體。

2. 放液：活塞向下移動，直接推動液體排出。

外置活塞式移液器的優(yōu)點在于其高精度和適用范圍廣，特別適合處理難以操作的液體，如高粘度或易揮發(fā)的化學試劑。

單按鈕技術

單按鈕技術是一種創(chuàng)新設計，通過一個按鈕即可完成吸液、放液和脫卸吸頭的操作。這種設計有效避免了液體反彈，減少了氣溶膠污染，同時減少了拇指的左右移動，降低了手部的重復性勞損。Eppendorf Reference系列移液器就是采用單按鈕操作的手動移液器。

單按鈕技術的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下幾個方面：

1. 簡化操作：吸液、放液和脫卸吸頭一步到位，提高實驗效率。

2. 減少污染：有效防止液體反彈，減少氣溶膠污染。

3. 降低疲勞：減少手部重復性操作，降低手部勞損風險。

特殊應用的移液器

384孔板的快速加樣 - 16/24通道移液器

在高通量篩選實驗中，384孔板的加樣操作非常普遍。Eppendorf的16/24通道移液器和epT.I.P.S.® 384吸頭可以一步完成16孔和24孔的加樣操作，大大提高了實驗效率和安全性。

這種設計的優(yōu)勢在于：

1. 高效加樣：一次操作即可完成多個孔的加樣，適合高通量實驗。

2. 減少誤差：避免了使用8/12通道移液器帶來的冗長和容易出錯的加樣過程。

3. 簡化流程：手動完成工作站體系建立及驗證工作，可作為工作站的備份方案。

不同容器類型之間的樣品轉移 - Move It可調間距移液器

Move It可調間距移液器是一種創(chuàng)新設計，可以加速和簡化不同容器間的樣品轉移。其無管道鏈接的設計提高了精確度和耐用性，同時也增加了操作和樣品的安全性。

這種移液器的應用場景包括：

1. PCR和qPCR：在分子生物學中，常用于基因表達、基因編輯的實驗。

2. 免疫學實驗：適用于抗體分析、ELISA實驗等。

3. 細胞培養(yǎng)：用于細胞篩選、細胞增殖、包被及基于細胞的分析。

電動移液器和分液器

電動移液器和分液器在處理冗長連續(xù)分液、放射性或腐蝕性液體的分液、易揮發(fā)或黏稠液體的精準移液等方面具有顯著優(yōu)勢。例如，Eppendorf Xplorer和Xplorer plus電動移液器，以及Multipette E3/E3x電動分液器，都能大幅減少隨機誤差和系統(tǒng)誤差，提高實驗結果的可重復性和準確性。

這些電動移液器的主要特點包括：

1. 自動化操作：減少人為誤差，提高操作精度。

2. 多功能模式：適用于不同類型的液體分液需求。

3. 高效便捷：適合大規(guī)模實驗，提高實驗通量。

如何正確使用移液器？

正確使用移液器不僅可以提高實驗的準確性和重現(xiàn)性，還能延長移液器的使用壽命。以下是一些使用移液器的建議和技巧：

1. 挑選合適的吸頭：吸頭和移液器同等重要，只有使用高質量的吸頭才能體現(xiàn)移液器的精確性。推薦使用廠家原裝吸頭。

2. 選擇適合量程的移液器：移液器最大量程的30%-100%是較佳使用范圍。

3. 裝配吸頭：將移液器吸嘴垂直插入吸頭，輕壓上緊，切勿上下敲擊或左右搖晃，以免損壞移液器內部零件。

4. 調節(jié)刻度：旋轉刻度調節(jié)旋鈕，從大量程調節(jié)至小量程，精度更佳；從小量程調節(jié)至大量程時，最好先調至略大一點，再返回。

5. 吸取液體：

• 保證垂直吸液，根據(jù)流體靜力壓原理，移液器斜著吸液將使體積偏大。

• 吸頭盡量浸沒得淺一些，防止液體殘留在吸頭表面；但同時要浸沒得足夠深，防止吸取空氣。

• 至少預潤濕3次，使得空氣柱充滿飽和的液體分子（特別是在移取易揮發(fā)性液體時）。

• 吸、放液體應該緩慢、勻速，以提高移液精準性。推薦使用電動移液器，電動馬達驅動，減少人為誤差，提供精準度。

• 吸取液體后稍稍停留一會兒（特別是對于大量程移液器）。

6. 打出液體：放液時吸頭靠在容器內壁（特別是對于20 μL以下的體積），移液器角度為20°-45°。對于10 μL以下的體積，直接放液到容器底部。

結論

移液器作為現(xiàn)代生物科學和生物技術實驗室中的工具，其準確性和可靠性直接影響實驗數(shù)據(jù)的質量。通過了解移液器的發(fā)展歷史、分類、工作原理及其在特殊應用中的優(yōu)勢，研究人員可以更好地選擇和使用移液器，從而提高實驗效率和數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性。正確使用移液器不僅可以提高實驗結果的準確性，還能延長移液器的使用壽命。關注Eppendorf，獲取更多關于移液器使用的技巧和最新資訊。