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實驗室常規(guī)醫(yī)用離心技術(shù)功能需求

來源:長沙駿逸實驗儀器有限公司   2012年04月08日 23:36  

裝備應(yīng)考慮的主要問題及功能配置  

    通用實驗室醫(yī)用離心機可能會深入到每一個技術(shù)相關(guān)實驗室,是一個潛在發(fā)展的市場,應(yīng)當引起裝備管理方面的高度重視。在明確實驗室的主次技術(shù)需求及相應(yīng)離心方法的前提下,zui大rcf、rpm、樣品量是選擇離心技術(shù)的基本參數(shù),要在此基礎(chǔ)上考慮離心機的選型、主要功能及兼顧功能的配置。  

    3.1醫(yī)用實驗室常規(guī)離心技術(shù)功能需求  

    3.1.1RNA離心制備  

    培養(yǎng)細胞在低速離心(水平轉(zhuǎn)頭,300xg)完成細胞分離、裂解后,加RNA沉淀提取液,于4℃,10000~12O00xg(角轉(zhuǎn)頭,微量1.5/2.0mlEppendorf管,或≥15ml、50ml管)分步提取;組織樣本需先經(jīng)勻漿預(yù)處理。  

    3.1.2DNA離心制備  

    水平轉(zhuǎn)頭,2000xg左右,1.5/2.0mlEppendof管,15ml、50mlFalcon管或更大體積;再經(jīng)12000~27000xg。制備質(zhì)粒DNA:角轉(zhuǎn)頭,250ml或500m1/瓶,5000-6000xg;15-50rnl/管,12000~27000xg;4℃或特定溫度。  

    3.1.3載體表達蛋白分離  

    角轉(zhuǎn)頭,250~500ml/瓶,4000xg;15~50mlFalcon管,3O00xg;角轉(zhuǎn)頭,50ml管/瓶,27000xg;4℃。  

    3.1.4細胞純化和亞細胞器分離  

    用差速離心法分離細胞器和大小差別懸殊的細胞。由低速分步到高速離心,細胞器的沉降順序是細胞核、線粒體、溶酶體、過氧化酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核蛋白體,所有過程控溫4℃。  

    收集細胞:水平轉(zhuǎn)頭,850~1850xg,優(yōu)選錐形底管;分離細胞核和細胞質(zhì),3300xg;核提取,25O00xg。進一步純化分離將聯(lián)用超速離心。  

    密度梯度速率沉降法分離密度相近而大小不等的細胞或__細胞器。采用合適的密度梯度介質(zhì),水平轉(zhuǎn)頭,1OOxg左右。等密度梯度法分離細胞器,10000-30O00xg。  

    3.1.5細胞學涂片離心通過在個別機型上配置細胞學涂片離心轉(zhuǎn)頭,實現(xiàn)一次4片離12,;據(jù)細胞學特性,rc啦制在5O~1000xg。選購時需注意離心容器的zui小樣品處理量。  

    3.1.6離心超濾、濃縮、抽提  

    配合市售離心過濾濃縮管(1.5~80ml,Coming,Millipore,Spectrum等)或樣品抽提容器使用,采用角轉(zhuǎn)頭或水平轉(zhuǎn)頭,角轉(zhuǎn)頭可使超濾膜與離心力不成直角而避免濃度極化;1000~l2O00xg不等,可參考所購容器的使用說明。  

    3.1_7微孔板離心  

    酶標板、TC板、PCR板以及樣品抽提純化板的離心,在通用離心機可通過在大容量水平轉(zhuǎn)頭上配置微孔板吊架(rcf_-般將低于轉(zhuǎn)頭的額定值)或選用專門離心轉(zhuǎn)頭實現(xiàn),≥1O00xg。每個吊架可放1~4塊標準96孔板或更多。 


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以上資料由www.xiangyikj.com 長沙駿逸實驗儀器有限公司提供            
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