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探索透明質(zhì)酸行業(yè)的奧秘丨科技引領(lǐng)美麗與健康新風(fēng)尚

來源:安捷倫科技(中國)有限公司   2024年09月26日 14:24  

透明質(zhì)酸,又被稱為玻尿酸,是一種由 N - 乙酰氨基葡萄糖和 D - 葡萄糖醛酸組成的天然高分子粘多糖。它廣泛存在于人體的眼玻璃體、關(guān)節(jié)、臍帶、皮膚等部位,是細(xì)胞外基質(zhì)的重要成分,具有獨特的保水性、潤滑性、黏彈性和良好的生物相容性。


透明質(zhì)酸的應(yīng)用

 

透明質(zhì)酸應(yīng)用范圍非常廣泛,比如作為眼部粘彈劑應(yīng)用于人工晶體植入手術(shù),保護(hù)眼內(nèi)組織,提高手術(shù)成功率;作為骨科填充劑用于骨性關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等關(guān)節(jié)手術(shù),緩解疼痛,改善關(guān)節(jié)功能;在創(chuàng)傷治療方面,還可促進(jìn)皮膚傷口愈合,預(yù)防術(shù)后粘連,加速組織修復(fù)。

 

此外,透明質(zhì)酸還廣泛應(yīng)用于醫(yī)療美容領(lǐng)域,比如作為注射填充材料,達(dá)到面部除皺、塑形、豐唇等效果,讓肌膚煥發(fā)年輕光彩。也可作為化妝品的重要成分,起到深層補水鎖水,改善膚質(zhì),提升肌膚彈性和光澤度的作用。


透明質(zhì)酸的分析和檢測

 

透明質(zhì)酸領(lǐng)域主要的遵循的標(biāo)準(zhǔn)和指導(dǎo)原則有:

YY/T 1571-2017 組織工程醫(yī)療器械產(chǎn)品 透明質(zhì)酸鈉

YY/T 0962-2021 整形手術(shù)用交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠

YY/T 0308-2015 醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉凝膠

透明質(zhì)酸鈉類面部注射填充材料非臨床注冊申報資料基本要求

透明質(zhì)酸鈉類面部注射填充材料注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

根據(jù)上述法規(guī)中規(guī)定的各項檢測要求,安捷倫開發(fā)了針對透明質(zhì)酸分析檢測的完整解決方案,涵蓋紅外鑒別、透明質(zhì)酸含量、紫外吸收、分子量及分布系數(shù)、蛋白質(zhì)含量、重金屬含量、乙醇?xì)埩袅?、交?lián)劑殘留量、游離透明質(zhì)酸含量等多個項目,提供一站式分析儀器服務(wù),為透明質(zhì)酸檢測實驗室保駕護(hù)航。以下為部分分析方案展示:

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透明質(zhì)酸分子量和分布系數(shù)測定

透明質(zhì)酸根據(jù)聚合程度的不同,分子量從 5K 到 20M Da 不等。不同分子量透明質(zhì)酸表現(xiàn)出不同的物理學(xué)和生物學(xué)特性,可用于不同的應(yīng)用場景,醫(yī)美常用的透明質(zhì)酸,分子量多在 1000K Da 以上。

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圖 1. 透明質(zhì)酸分子式

 

使用 Agilent SUPREMA 色譜柱搭配 GPC/SEC-MALS 可以對透明質(zhì)酸進(jìn)行分子量和質(zhì)量分布分析,該色譜柱具有優(yōu)化的填料粒徑和孔徑,可提供穩(wěn)定的分離和可靠的結(jié)果。該方法的優(yōu)勢在于可獲得絕對摩爾質(zhì)量,而帶濃度檢測器的傳統(tǒng) GPC/SEC 則只能提供表觀摩爾質(zhì)量。

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圖 2. 透明質(zhì)酸樣品的曲線(紅色:RI - 檢測器曲線(濃度),黑色:實測摩爾質(zhì)量 (MALLS))

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圖 3. 透明質(zhì)酸樣品的摩爾質(zhì)量分布與累積分布

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透明質(zhì)酸含量測定

在《醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉敷料》法規(guī)的征求意見稿中,給出了用液相色譜法測定透明質(zhì)酸含量的方法,使用 Poroshell Hilic-z 色譜柱搭配 Agilent Infinity 系列 HPLC,可實現(xiàn)透明質(zhì)酸鈉和軟骨素混合樣品酶解溶液的分離和檢測。

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圖 4. 透明質(zhì)酸鈉和軟骨素混合溶液酶解后的液相色譜結(jié)果(濃度約 0.025 mg/mL)

 

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透明質(zhì)酸產(chǎn)品添加劑檢測

氨基酸在線衍生檢測方案

使用 Agilent Infinity 系列 HPLC 自帶的程序進(jìn)樣功能,可以實現(xiàn)氨基酸在線衍生和檢測。

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圖 5. HPLC 在線衍生法測氨基酸含量

 

該方案無需額外的軟件或硬件成本,速度快,效率高。此外液相-單四極桿質(zhì)譜還可實現(xiàn)氨基酸的直接檢測,無需衍生,進(jìn)一步減少步驟和時間。

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圖 6. LC-SQ 測氨基酸的典型譜圖及條件

利多卡因檢測方案

醫(yī)美注射劑里常添加利多卡因等麻醉劑,以降低注射過程中的痛感,因此此類產(chǎn)品中的利多卡因定性定量分析也是必不可少的項目。

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圖 7.  用 HPLC 測利多卡因和 2,6 - 二甲基苯胺的典型譜圖及條件

 

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透明質(zhì)酸交聯(lián)劑殘留量檢測

天然的透明質(zhì)酸結(jié)構(gòu)松散,在這種松散狀態(tài)下,體內(nèi)的半衰期只有 1~2 天。丁二醇縮水甘油醚 (BDDE) 等交聯(lián)劑可以把這些鏈條串聯(lián)起來,讓其形成 3D 網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),從而降低代謝速度,最終讓其成為理想的填充材料。BDDE 殘留量的檢測通常使用氣相方法:

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工藝雜質(zhì)分析

透明質(zhì)酸鈉生產(chǎn)和加工過程中,可能會有工藝雜質(zhì)的殘留。下述實驗在 1260 Infinity  II + 1290 ELSD 液相系統(tǒng)上,采用 Poroshell 120 HILIC-5OH 色譜柱在 HILIC 模式下開用了針對多種工藝雜質(zhì)在交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠樣品中的殘留含量的分析方法,靈敏度滿足用戶檢測定量要求(40 ppm,即主成分含量的 0.2%)。

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圖 8. HPLC 1260 + ELSD 檢測器測透明質(zhì)酸樣品中的工藝雜質(zhì)譜圖

 

采用通用型檢測器 1290 ELSD 不僅可以檢測到雜質(zhì)成分同時也可以看到對應(yīng)的鹽離子,可作為輔助參考。從終產(chǎn)品樣品峰與氯化鈉的疊加色譜圖和樣品配制信息來看,樣品中的基質(zhì)峰應(yīng)該主要來自于氯化鈉溶液和磷酸溶液,即氯離子、鈉離子和磷酸根離子,工藝雜質(zhì)可以實現(xiàn)與基質(zhì)峰的基線分離。

 

如需獲取《安捷倫醫(yī)療器械完整解決方案》的介紹,掃描下方二維碼即可獲得:

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