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假病毒真本領(lǐng),助力疫苗開發(fā)、病毒學(xué)研究、中和抗體篩選

來源:北京義翹神州科技股份有限公司   2024年10月22日 16:22  

許多能夠引起人類疾病的病毒屬于包膜病毒,如新冠病毒、猴痘病毒、流感病毒、埃博拉病毒、狂犬病毒、基孔肯雅病毒等。這些病毒株的獲得是一個復(fù)雜耗時的過程,且危險性高,需要在生物安全3級或4級實驗室進(jìn)行,嚴(yán)重限制了研究、預(yù)防和治療效率。

 

假病毒(Pseudovirus)技術(shù)的出現(xiàn)解決了這些難題。假病毒基于包膜蛋白構(gòu)建,不需要分離培養(yǎng)活病毒,且只能復(fù)制一次,可在BSL-2實驗室操作。假病毒含有報告基因,能夠模擬天然包膜病毒的表面特征,易于定量分析。

 

根據(jù)核心基因組來源,假病毒可以分為3類:HIV-1基因組、VSV基因組和MLV基因組。假病毒在體外完成核心基因組和包膜蛋白的組裝,通過質(zhì)?;蚍€(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系表達(dá)包膜蛋白,用于感染靶細(xì)胞,模擬活病毒感染過程。

 

2-1.jpg


 

不同假病毒獲取示意圖(源自文獻(xiàn):doi: 10.1016/j.micres.2022.126993)

 

假病毒已成為病毒學(xué)研究中的重要工具之一。義翹神州已成功開發(fā)一系列高品質(zhì)假病毒產(chǎn)品,覆蓋SARS-CoV-2、MERS、流感等多種病毒,廣泛應(yīng)用于病毒感染機(jī)制研究、血清中和抗體檢測以及疫苗效價評估、抗病毒-藥物篩選和評價等研究。

 

 

01病毒感染機(jī)制研究

眾-所周知,ACE2是SARS-COV-2的關(guān)鍵受體。但是在不表達(dá)ACE2的器官中也能檢測到該病毒,表明可能存在其他受體或共受體介導(dǎo)病毒感染。中國科-學(xué)院昆明動物研究所賴仞團(tuán)隊聯(lián)合多個研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)直接與病毒刺突蛋白高親和力結(jié)合,是另一種介導(dǎo)SARS-COV-2感染的受體。Omicron假病毒證實過表達(dá)TfR和ACE2的細(xì)胞感染率更高。

 

 

SARS-COV-2原始毒株和Omicron突變假病毒(貨號:PSV017)感染過表達(dá)人TfR和ACE2的BHK-21細(xì)胞,結(jié)果顯示Omicron感染率更高。

2-2.jpg

(源自文獻(xiàn):doi: 10.1073/pnas.2317026121)

 

 

 

02中和抗體檢測

清華大學(xué)向宇研究團(tuán)隊通過對RBD的核酸適配體進(jìn)行修飾,篩選獲得一種阻斷RBD-ACE2結(jié)合的共價化合物。此化合物通過與RBD形成共價鍵來中和SRAS-COV-2假病毒感染,使假病毒中和效應(yīng)比對照高25倍以上。研究證實利用共價抑制機(jī)制開發(fā)新冠抑制劑抗病毒-藥物潛力巨大。

單克隆抗體和共價核酸適配體6C3-7SF、6C3、6C3-7PS的假病毒(貨號:PSV001)中和活性檢測結(jié)果

2-3.jpg

(源自文獻(xiàn):doi: 10.26434/chemrxiv-2021-nd0r2-v2)

 

03疫苗免疫效果的評價

上海交通大學(xué)崔大祥團(tuán)隊為提高亞單位疫苗免疫原性,研制了一種新型疫苗佐劑體系,獲得氧化石墨烯復(fù)合佐劑納米疫苗(GCR)及微針貼片疫苗(MGCR)。假病毒(貨號:PSV001)中和血清檢測數(shù)據(jù)顯示接種第2針疫苗后,GCR新型疫苗中和效果更好。

 

 

接種GCR疫苗小鼠血清的假病毒中和活性

2-4.jpg

(源自文獻(xiàn):doi: 10.7150/thno.83390)

04抗病毒-藥物篩選

徐州醫(yī)科大學(xué)的鄭駿年、白津團(tuán)隊首-次發(fā)現(xiàn)PRMT5特異性抑制劑GSK3368595(全-球臨床研究已進(jìn)入Ⅱ期)能夠明顯抑制新冠病毒刺突蛋白與ACE2受體結(jié)合,抑制病毒感染宿主細(xì)胞。本研究通過設(shè)置抑制劑濃度、敲低或過表達(dá)PRMT5,檢測新冠假病毒(貨號:PSV001)感染過表達(dá)ACE2的HEK-293T或A549細(xì)胞,結(jié)果顯示GSK3368595能夠抑制新冠假病毒感染。

2-6.jpg

 

客戶提交的假病毒感染結(jié)果圖

 

 

 

?義翹神州假病毒產(chǎn)品列表

貨號

產(chǎn)品名稱

PSV030

SARS-CoV-2 XBB.1.5 (Omicron) Spike Pseudovirus

PSV038

 

SARS-CoV-2 EG.5.1 (Omicron) Spike Pseudovirus

PSV039

 

SARS-CoV-2 JN.1 (Omicron) Spike Pseudovirus

PSV004

 

Influenza A H3N2 (A/Panama/2007/1999) Pseudovirus

PSV036

 

Influenza B 

 

免責(zé)聲明:義翹神州內(nèi)容團(tuán)隊僅是分享和解讀公開的研究論文及其發(fā)現(xiàn),專注于介紹全-球生物醫(yī)藥研究新進(jìn)展。本文僅作信息交流用,文中觀點不代表義翹神州立場。隨著對疾病機(jī)制研究的深入,新的實驗結(jié)果或結(jié)論可能會修改或推-翻文中的描述,還請大家理解。

 

本文不屬于治療方案推薦,如需獲得治療方案指導(dǎo),請前往正規(guī)醫(yī)院就診。

【參考文獻(xiàn)】

1. Qi Xiang, et al. Application of pseudovirus system in the development of vaccine, antiviral-drugs, and neutralizing antibodies. Microbiological Research, 2022. doi.org/10.1016/j.micres.2022.126993

2. Zhiyi Liao, et al. Human transferrin receptor can mediate SARS-CoV-2 infection. PNAS, 2024. doi.org/10.1073/pnas.2317026121

3. Zichen Qin, Yiying Zhu and Yu Xiang, Covalent Bonding Aptamer with Enhanced SARS-CoV-2 RBD-ACE2 Blocking and Pseudovirus Neutralization Activities. ChemRxiv, 2021. doi: 10.26434/chemrxiv-2021-nd0r2-v2

4. Ang Gao, et al. Developing an efficient MGCR microneedle nanovaccine patch for eliciting Th 1 cellular response against the SARS-CoV-2 infection. Theranostics, 2023. doi: 10.7150/thno.83390

5. Zhongwei Li, et al. GSK3326595 is a promising drug to prevent SARS-CoV-2 Omicron and other variants infection by inhibiting ACE2-R671 di-methylation. J Med Virol, 2023. doi: 10.1002/jmv.28158.


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