一、應(yīng)用概述

對(duì)可重復(fù)使用的Teledyne ISCO RediSep Silver反相C18和RediSep Gold^®高性能C18、C18Aq及C8色譜柱進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理、清洗和儲(chǔ)存，有助于延長(zhǎng)柱子壽命并提高其一致性和可靠性。

二、通用方法

初始預(yù)處理

在使用前，用六倍柱體積（CV）的1:1水：乙腈沖洗柱子?；蛘?，通過柱子泵入兩倍柱體積的100%乙腈，然后蓋上蓋子存放一小時(shí)后再使用。有關(guān)柱體積數(shù)據(jù)，請(qǐng)參見表1。

表1：色譜柱數(shù)據(jù)

樣品負(fù)載能力

色譜柱上的樣品負(fù)載應(yīng)為柱介質(zhì)重量的0.1%到2%。

運(yùn)行后維護(hù)

在適當(dāng)?shù)木S護(hù)下，RediSep C18色譜柱可以使用三十次或更多。反相方法應(yīng)該編寫成在分離結(jié)束時(shí)，用2-4倍柱體積（CV）的高比例（100%）有機(jī)溶劑（B溶劑）沖洗柱子。經(jīng)過2-4 CV的沖洗后，可以將有機(jī)溶劑的比例恢復(fù)到初始條件并沖洗2-3 CV，以準(zhǔn)備下一次運(yùn)行的柱子平衡條件（見圖1）。或者，可以將有機(jī)溶劑的比例改為80%，以便為色譜柱存儲(chǔ)做準(zhǔn)備。

圖1. 運(yùn)行后色譜柱沖洗

三、存儲(chǔ)

C18色譜柱可以長(zhǎng)時(shí)間存儲(chǔ)而不會(huì)損失性能。以下是反相C18色譜柱存儲(chǔ)的一些通用規(guī)則：

• 一旦潤(rùn)濕后，切勿讓反相色譜柱干燥。這將由于固定相的膨脹和收縮而導(dǎo)致通道效應(yīng)。如果Flash色譜系統(tǒng)上有空氣吹掃功能，應(yīng)關(guān)閉該功能。

• 將色譜柱濕潤(rùn)并蓋好，存儲(chǔ)在含有10-30%水和70-90%有機(jī)溶劑（如乙腈、甲醇或乙醇）的環(huán)境中。

四、總結(jié)

在使用前預(yù)處理色譜柱。用高比例（100%）有機(jī)溶劑清潔色譜柱。切勿讓色譜柱干燥，并以70-90%有機(jī)溶劑濕潤(rùn)和蓋好存儲(chǔ)。