稀釋比例:推薦進(jìn)行5倍、10倍和20倍的稀釋。
目的:比較不同稀釋倍數(shù)下的樣本對(duì)OD值的影響,確定最佳稀釋倍數(shù)。
操作步驟:反應(yīng)完成后,吸取200μL反應(yīng)液加入96孔板中。
波長(zhǎng)選擇:在哈靈生物酶標(biāo)儀中,選擇420nm(±10nm)波長(zhǎng)讀取吸光值。
光徑:光徑約為0.576cm,這是一個(gè)大概值,用于計(jì)算吸光度時(shí)的參考。
比色皿選擇:使用1cm光徑的石英比色皿讀取吸光度。
吸光度目標(biāo):當(dāng)吸光度達(dá)到0.4左右時(shí),認(rèn)為試劑三濃度合適。
材質(zhì)重要性:石英材質(zhì)比色皿對(duì)紫外光透過(guò)性好,保證測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。非石英材質(zhì)可能影響測(cè)量結(jié)果。
精確操作:確保樣本準(zhǔn)確稀釋、試劑精確配制、儀器正確使用。
結(jié)果分析:仔細(xì)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和實(shí)驗(yàn)的有效性。
實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ):通過(guò)細(xì)致的工作,確保實(shí)驗(yàn)成功,為后續(xù)研究提供堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。
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