FGF-23 ELISA試劑盒/Human FGF-23 ELISA Kit檢測(cè)原理：

FGF-23 ELISA試劑盒是用于測(cè)量血清中FGF-23的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒。兩種特異性小鼠單克隆抗體結(jié)合全長(zhǎng)FGF-23。其中一種抗體固定在微量滴定板上進(jìn)行捕獲。另一種抗體與HRP（辣根過氧化物酶）綴合用于檢測(cè)。

在這個(gè)反應(yīng)中，將含有FGF-23的樣品與固定在微量滴定孔的抗體一起培養(yǎng)。用抗體捕獲樣品中的FGF-23。在該反應(yīng)結(jié)束時(shí)，洗滌該孔以去除未結(jié)合的FGF-23和其他組分。

在第二個(gè)反應(yīng)中，將這種固定的FGF-23與HRP標(biāo)記的抗體一起溫育以形成“三明治”復(fù)合物：抗FGF-23抗體 - N端FGF-23C端-HRP標(biāo)記的抗FGF-23抗體。在該反應(yīng)結(jié)束時(shí)，洗滌該孔以除去未結(jié)合的組分。

在酶反應(yīng)中，將固定在孔上的夾心復(fù)合物與底物溶液一起孵育，然后用分光光度微量滴定板讀數(shù)器測(cè)量。與孔結(jié)合的復(fù)合物的酶活性與樣品中FGF-23的量成正比。通過繪制吸光度與FGF-23標(biāo)準(zhǔn)品各濃度的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。從該曲線確定樣品中FGF-23的濃度。

艾美捷FGF-23 ELISA試劑盒/HumanFGF-23 ELISA Kit：

中文名稱：FGF-23 ELISA試劑盒(Kainos CY-4000)

英文名稱：HumanFGF-23ELISAKit

品牌：Kainos Laboratories

貨號(hào)：CY-4000

規(guī)格：96T

反應(yīng)種屬：Human

樣本類型：Serum

FGF-23 ELISA試劑盒/Human FGF-23 ELISA Kit組成：

1）FGF-23抗體包被微孔板（FGF-23板）

用抗FGF-23的鼠單克隆抗體包被微孔板96孔微孔板。

2）HRP標(biāo)記的FGF-23抗體（FGF-23綴合物）

12mL與辣根過氧化物酶綴合的FGF-23的鼠單克隆抗體與防腐劑混合。該試劑應(yīng)儲(chǔ)存在2-10℃并避光。

3）FGF-23校準(zhǔn)液（STD1～std7）

用防腐劑緩沖FGF-23的FGF-23標(biāo)準(zhǔn)品（Std1-Std7）12mL（Std1）和0.5mL（Std2-Std7）。7瓶含有防腐劑的緩沖堿的FGF-23。

4）測(cè)定稀釋劑（AssayDiluent）

12mL緩沖液。

5）顯色劑（底物）

12mL四甲基聯(lián)苯胺TMBZ）與過氧化氫脲。

6）FGF-23清洗緩沖液（10倍濃縮）

53毫升緩沖表面活性劑與防腐劑的10倍濃縮溶液。使用前，用去離子水將內(nèi)容物稀釋至10倍并充分混合。

7）終止液（終止液）

12mL0.5mol/L硫酸。

8）封板器

試劑盒中包含密封板三。

注：這些試劑應(yīng)在黑暗中儲(chǔ)存在2-10℃。使用前將所有試劑置于室溫下。

使用注意事項(xiàng)：

1）測(cè)試樣品的儲(chǔ)存條件是什么？

使用鮮的血清樣本。如果您無法立即測(cè)試您的樣品，請(qǐng)將其存放在-70°C以下。避免解凍/重新冷卻循環(huán)。

在我們的實(shí)驗(yàn)室測(cè)試中，在冰箱中13天后，給定樣品的活性降至86.6％。樣品在-80°C下可保持穩(wěn)定約三年，但在-20°C時(shí)穩(wěn)定性不能得到保證。

我們已確認(rèn)zui多六次解凍/再次凍結(jié)循環(huán)可能不會(huì)影響活動(dòng)，但我們建議小批量?jī)鼋Y(jié)樣本，以盡量縮短解凍/再次凍結(jié)周期。

2）試劑盒檢測(cè)的樣本

雖然血漿和血清都可以使用FGF-23 ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，但建議使用血清。

3）試劑盒是否可以測(cè)試動(dòng)物樣本？

FGF-23ELISA試劑盒可用于測(cè)量小鼠，大鼠或猴血FGF-23水平。

4）試劑盒是否含有任何汞基防腐劑？

FGF-23 ELISA試劑盒不使用水銀防腐劑，如硫柳汞。標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋溶液，酶標(biāo)抗體溶液和濃縮洗滌溶液使用Kathon TM CG作為防腐劑。

5）操作預(yù)防措施

校準(zhǔn)曲線必須為每次測(cè)試準(zhǔn)備。

如果測(cè)試多個(gè)樣品，則反應(yīng)時(shí)間必須保持一致。

攪拌板時(shí)必須進(jìn)行一級(jí)反應(yīng)。攪拌前應(yīng)密封盤子。

洗滌周期中必須遵守以下預(yù)防措施：

不要將洗版溶液留在其中。

一旦從井中充分移除洗滌液，立即進(jìn)入下一步。

試劑使用方法：

1）在支架上準(zhǔn)備足夠數(shù)量的抗體涂層帶。

2）向孔中加入50μL檢測(cè)稀釋劑。

3）向每個(gè)孔中加入50μLFGF-23標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，并用平板密封器蓋住平板。

4）在板式混合器上在室溫下孵育平板2小時(shí)。

5）拆卸封板器。吸取每孔中的樣品。用300μL工作洗滌緩沖液洗滌每個(gè)孔4次，并w全吸出內(nèi)容物。

6）向每個(gè)孔中加入100μL的FGF-23結(jié)合物并用封板器覆蓋該板。

7）在平板混合器上在室溫下孵育平板1小時(shí)。

8）拆卸封板器。吸取每孔中的樣品。每孔用300μL工作洗滌緩沖液洗滌4次，并將其w全吸出。

9）向每個(gè)孔中加入100μL底物，并用平板封口機(jī)和鋁箔覆蓋平板。

10）在室溫下孵育板30分鐘。

11）去除封口機(jī)和鋁箔。立即加入100μL終止液到每個(gè)孔。在平板混合器上搖動(dòng)板1分鐘。

12）用微量滴定板讀數(shù)器在10分鐘內(nèi)讀取450nm處的吸光度。