(1)開機之前液體樣品和試劑、槍頭、96孔板的放置。一般A1放置槍頭(帶槍頭盒),規(guī)格50µl,一次可放96個。A2位置放置試劑槽(Reservoir Rack一次最多可放7個試劑槽)。B1位置放置Rack,Rack上小孔,最多可直接放置24個1.5ml或2ml離心管(管中放置樣品或試劑);Rack配置12個適配器,可放置200的PCR管(適合少量樣品和試劑的轉移)。B2位置放置96孔PCR反應板(帶96孔板適配器)。
(2)連接儀器電源,打開儀器電源開關。
(3)大約5分鐘后,顯示器直接顯示儀器控制軟件界面。
(4)軟件主界面介紹:File/Exit to Start Screen打開控制軟件所顯示的起始界面;File/Show Keyboard顯示電子鍵盤,保存文件給文件命名時,輸入數字或字母均需要打開電子鍵盤;File/Show Keyboard Automatically選中該項,在需要輸入字母或數字時自動顯示電子鍵盤;File/Sound Enabled關閉聲音;File/Shutdown關閉儀器控制軟件,點擊該項關閉過程結束時,顯示器黑屏。
(5)Help/5《HeIpYDeviceManuaIsepMotion5070,eIp/Software《/epmotion507儀器硬件介紹及其使用。Help/Software Manuals Information儀器生產許可證信息。Help/About epBlue epBlue總體信息。Help/Open Source Licenses打開源許可證協議
(6)點擊“Application Runner”圖標,查看已編輯程序的大概信息,出現“Application Runner"界面。(a)點擊“Eppendorf"圖標,界面中間出現控制軟件的名稱。適合控制本機軟件的名稱為“Fil384_5070”和“Fill96_5070”兩個。雙擊兩個文件,出現“Available devices”和“Workable”信息。可顯示儀器編號、使用移液槍的類型、操作面板排布等信息。(b)點擊“Home”圖標,出現用戶編輯和已使用過的程序信息。雙擊程序名稱,可查看程序可控制硬件的大概信息。
(7)點擊軟件起始的主界面“Application Editor”圖標,出現“Application Editor”,選中“Home”圖標,雙擊界面中間程序名稱,可編輯或運行已存在的程序。
(8)點擊“New Application”圖標,編寫新的運行程序,出現“Create new application”界面,在Name框中填寫程序名稱,點擊“OK”。
(9)界面頂端中部出現“Home/程序名稱 -Applicatio Editor”,即可開始編輯運行程序。
(10)編輯工作界面“Worktable”。該儀器沒有配置Park1、Park2、Park3區(qū)域,因此不用對其進行設置。T1/T2為放置單通道和8通道移液槍,儀器自動進行識別。 Waster為廢槍頭收集區(qū)域。A1/A2/B1/B2為需要編輯區(qū)域,主要設置PCR板、樣品、試劑放置的位置。
(11)A1位置通常放置槍頭(帶槍頭盒)。設置方法:“Workable”界面下選中左側“Tips”,在Labware界面選擇“tips”類型。例如槍頭的類型為50µl規(guī)格(不帶過濾膜),選擇tip50:dws/tips/tip50,按下鼠標左鍵不放,直接拖到A1位置后松開鼠標,即可將A1設置為放50µl槍頭位置,點擊OK”。
(12)A2位置通常放置 Reservoir Racks with Moduless該模塊上可放置7個30ml試劑槽,后續(xù)操作步驟同A1。
(13)B1位置放置 Rack with tubes(管中可放置樣品或試劑)。設置方法:在界面左側 Labware category里面雙擊 Racks with Tubes在 labware里面出現各種規(guī)格的 Racks。本儀器配置的Racks為 Rack.5+Adaptor/1.5/2.0ml。在 Labware里面用鼠標選中“Rack0_5ml,dws/trth/rack0_5m不放,直接將該圖標拖至B1位置后松開鼠標。
(14)B2位置通常放置96孔反應板(置A2的試劑盒B1樣品分別轉移至96孔反應板的各個小孔中)。設置方法:在界面左側 Labware category中雙擊 Thermoblocks with Plates labware界面出現各種規(guī)格的 Thermoblocks with Plates。本儀器直接選中“EP_Tube_Thermo_0_2mldws/thermopl/EP_Tube_Thermo_0_2ml按下鼠標左鍵不放,直接拖至B2位置再松開鼠標,出現對話框點擊“OK”即可。
(15)在界面Workable下面用鼠標點擊“Switch to procedure”,界面切換到“命令設置”界面。(a)Liquid Transfer液體轉移,有6種類型:①Number of Samples樣品數量;②Sample Transfer樣品轉移;③Reagent Transfer試劑轉移;④Dilutes稀釋;⑤Pool試劑或樣品混合;⑥Pool one destination多種樣品或試劑混合在一起。(b)Process樣品轉移到目標孔后常見處理類型:①Mix樣品試劑轉移到小孔后進行混勻;②Pierce槍頭頂端移至液面以下加樣;③Wait等待,可設置等待的時間。