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關(guān)于布病抗體的檢測(cè)方法,哪種更合適您?

來源:賽諾利康生物技術(shù)(北京)有限公司   2024年12月02日 13:47  

布魯氏菌?。ê?jiǎn)稱布?。﹪?yán)重危害畜牧養(yǎng)殖業(yè)安全和人類健康,而有效的檢測(cè)方法能夠?yàn)椴疾〉念A(yù)防、檢測(cè)和凈化提供技術(shù)支持。


布病檢測(cè)方法很多,包括膠體金試紙條檢測(cè)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法、布病虎紅平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)、全乳環(huán)狀實(shí)驗(yàn)等,在眾多檢測(cè)方法中,膠體金試紙條檢測(cè)法最為簡(jiǎn)單方便,其檢測(cè)準(zhǔn)確性如何?


布病抗體檢測(cè)卡檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性如何?一起來關(guān)注——


布魯氏菌病抗體檢測(cè)方法有那些? 


01免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)(GICA)


免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)是基于抗原抗體檢測(cè)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù),在生物醫(yī)學(xué)的各領(lǐng)域得到了日益廣泛的應(yīng)用。


膠體金法將布魯氏菌抗原固定在NC濾膜上,當(dāng)待測(cè)樣本存在布魯氏菌病抗體時(shí),血清抗體將會(huì)有固定在NC膜上的抗原結(jié)合形成復(fù)合物,在膠體金顆粒的加持下,會(huì)顯色出紅色條帶,進(jìn)而判定樣本中是否存在抗體。GICA 具有高靈敏度、血清用量更少、適于現(xiàn)場(chǎng)操作、檢測(cè)樣品廣泛(部分GICA 產(chǎn)品檢測(cè)范圍可以涵蓋血清、全血、奶樣等不同樣品)等優(yōu)勢(shì)。


02酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)

用于布病檢測(cè)的 ELISA 有兩種:

①間接 ELISA(i ELISA)

②競(jìng) 爭(zhēng) ELISA(c ELISA)


i ELISA是待檢血清樣本中的布魯氏菌抗體與 ELISA 板上固定的布魯氏菌抗原物質(zhì)結(jié)合,利用酶標(biāo)抗體檢測(cè),然后通過底物顯色,最后用酶標(biāo)儀來讀值。i ELISA 靈敏度較高,標(biāo)記的抗體較少,成本更低,但是試驗(yàn)周期更長。c ELISA 步驟較復(fù)雜,但可以檢測(cè)含有布魯氏菌抗體的不純凈血清,數(shù)據(jù)再現(xiàn)性更高,但是整體敏感性和特異性稍低。


ELISA 檢測(cè)布病的敏感性較高,用酶標(biāo)儀判定試驗(yàn)結(jié)果,避免了肉眼觀察判定結(jié)果的誤差,但對(duì)專業(yè)儀器要求較高,檢測(cè)試劑比較昂貴,增加了檢測(cè)成本,此外檢測(cè)過程中對(duì)環(huán)境溫度的要求也較高,因而限制了ELISA 的使用。


03虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)


虎紅平板凝集試驗(yàn)是一種經(jīng)典的血清凝集試驗(yàn),靈敏度高、價(jià)格便宜、操作方便。但受試驗(yàn)溫度和凝集時(shí)間相對(duì)較短的影響,不易準(zhǔn)確判定 結(jié)果,而且受操作人員的主觀判斷影響比較大,故常作為篩選試驗(yàn),適用于具有專業(yè)知識(shí)背景的試驗(yàn)人員用于高危動(dòng)物篩查及流行病學(xué)的研究。


04試管凝集試驗(yàn)(SAT)


試管凝集試驗(yàn)是一種檢測(cè)血清中布魯氏菌抗體的方法。布魯氏菌抗原能夠與血清中的IgM抗體反應(yīng)產(chǎn)生凝集現(xiàn)象,通過肉眼觀察試管中的凝集現(xiàn)象可做出結(jié)果判定。試管凝集試驗(yàn)特異性較強(qiáng),不易受其他干擾因子影響,陽性結(jié)果比較準(zhǔn)確。


但試管凝集試驗(yàn)也存在一定的不足,如每個(gè)血清樣本需要4支試管來實(shí)現(xiàn)4個(gè)梯度的試驗(yàn),在進(jìn)行大批量樣本檢測(cè)時(shí),需要大量的試管,試驗(yàn)過程中還需要24h的孵育時(shí)間,不僅對(duì)耗材的需求量較大,且試驗(yàn)時(shí)間也較長。


05全乳環(huán)狀試驗(yàn)(MRT)


全乳環(huán)狀試驗(yàn)主要通過檢測(cè)牛奶樣本中的抗體來實(shí)現(xiàn)布病檢測(cè),且一般僅用于奶牛的布病檢測(cè),不適用于其他品種家畜。如果待檢牛奶樣本中存在布魯氏菌抗體,就會(huì)與試驗(yàn)用的紅色布魯氏菌抗原形成復(fù)合物,這些復(fù)合物會(huì)形成紫紅色的乳脂環(huán),從而實(shí)現(xiàn)布病檢測(cè)。相比較于其他需要血清的檢測(cè)方法;


全乳環(huán)狀試驗(yàn)具有一定的優(yōu)勢(shì),無論是單一奶牛的牛奶還是混合的大缸奶,都能實(shí)現(xiàn)布病檢測(cè),無需采血,不會(huì)使奶牛因驅(qū)趕、保定、采血等行為產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),使奶牛產(chǎn)量不受影響,養(yǎng)殖戶更容易接受。


全乳環(huán)狀試驗(yàn)的敏感性能夠滿足大型牛場(chǎng)布病的現(xiàn)場(chǎng)篩查,特異性較強(qiáng),操作快捷而簡(jiǎn)便,試劑成本不高,試驗(yàn)結(jié)果可靠準(zhǔn)確,全乳環(huán)狀試驗(yàn)是一種能夠代替試管凝集試驗(yàn)(SAT)的布病檢測(cè)方法。但是,如果牛奶樣本存放時(shí)間較長,或試驗(yàn)溫度較高導(dǎo)致牛奶樣本腐敗,檢測(cè)結(jié)果就可能出現(xiàn)假陽性。當(dāng)牛奶樣本中存在的初乳較多或者混合樣本量較大時(shí),也有可能出現(xiàn)一定的假陽性結(jié)果。


布魯氏菌病作為人畜共患病,檢測(cè)的方法包括抗原檢測(cè)法和血清/全血抗體檢測(cè)法兩大類型。其中病原檢測(cè)需要在專業(yè)的P3實(shí)驗(yàn)室或者專業(yè)的儀器配備相應(yīng)人才檢測(cè)等條件限制了此種檢測(cè)方法的應(yīng)用范圍,才導(dǎo)致了布魯氏菌病血清檢測(cè)法成為布魯氏菌病診斷的采用方法。


布病血清/全血抗體檢測(cè)的方法很多,膠體金法由于其操作便捷性和較高性價(jià)比,勢(shì)必逐步取代傳統(tǒng)虎紅平板法被用作現(xiàn)場(chǎng)布魯氏菌病的快速篩查的檢測(cè)產(chǎn)品。



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