各種動(dòng)物外周血和臟器組織白細(xì)胞分離試劑盒操作說明
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試劑盒內(nèi)容
試劑:全血及組織勻漿稀釋液100ml
試劑:細(xì)胞洗滌液100ml
試劑A: 100ml
試劑E:
50ml 說明書1份
操作方法(操作全過程應(yīng)在20-25度環(huán)境下進(jìn)行)
1, 取 1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液(或胎牛血清或人血清
懸起勻漿的細(xì)胞1X107/ml)1:1混合再與1ml的E液混勻置20度下
自然沉降10-15分鐘。吸取渾濁的上清部分,棄去底部紅細(xì)胞備用。
2, 用吸取渾濁的上清部分液體小心疊加在A液之液面上(比例為1:1)
,20度400g/分鐘,離心20分鐘(水平轉(zhuǎn)子),此時(shí)離心管中由上至
下細(xì)胞分四層。*層;為血漿層。第二層;為環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)
胞。第三層;為混濁分離液層(此層液體中含有大量白細(xì)胞)。
第四層;極少量紅細(xì)胞層(如無紅細(xì)胞層分離效果會(huì)更好),收集
第二,三層混濁分離液少量紅細(xì)胞層(如無紅細(xì)胞層分離效果
會(huì)更好)之表面液體放入含細(xì)胞洗滌液(Cat#:2010X1118)4-5 的試
管中,充分混勻后,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心10-30分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗
2次即得所需白細(xì)胞。(此方法效果較好,推薦使用)
注 意
TBD 實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞分離培養(yǎng)基是敏光型的。這種培養(yǎng)基在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于
各品牌離心機(jī)的性能不同,國(guó)內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)
節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),調(diào)節(jié)離心的時(shí)間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定)。組織, 血
液,細(xì)胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。
貯 藏
18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)
晶,影響分離效果。
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貨號(hào) 名稱 規(guī)格
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TBD2012MSCI 間充質(zhì)干細(xì)胞流式檢測(cè)系統(tǒng)50T
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