Shimadzu LC-40D高效液相色譜儀；

色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01）；

純水機：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；

SHIMSEN Disc HPPTFE針式過濾器（P/N：380-00341）；

LC-MS認證樣品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air移液槍：Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）；

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-10000）。

1.2 標準溶液配制

稱取生物素標準品適量，加水溶解并配置成濃度分別為 40 μg/mL和2 μg/mL的標準溶液。

1.3 試樣處理

稱取研磨為粉末的試樣2.0 g，加水25 mL，超聲提取20 min，冷卻，搖勻，離心，取上清液過0.22 μm濾膜，即得。

1.4 分析條件

色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01）

柱溫：37 ℃

檢測器：PDA 200 nm

流速：0.6 mL/min

進樣量：20 μL

流動相：A：0.05 mol/L 磷酸二氫鉀（用磷酸調(diào)節(jié)pH 為3.5）

B：乙腈

按照上述色譜條件（1.4）進行采集，標準溶液和試樣溶液色譜圖如下：