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GM12878 人B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)和應(yīng)用 凍存條件 培養(yǎng)條件

來(lái)源:吉奧藍(lán)圖(廣東)生命科學(xué)技術(shù)中心   2025年01月14日 14:52  
GM12878是一種人B淋巴細(xì)胞系,具有以下特點(diǎn)和應(yīng)用:

基本信息

  • 來(lái)源:GM12878細(xì)胞系源自一位白人女性的外周血B淋巴細(xì)胞,通過(guò)Epstein-Barr病毒(EBV)轉(zhuǎn)化獲得。
  • 細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣,呈懸浮生長(zhǎng)。
  • 培養(yǎng)條件:通常使用RPMI-1640培養(yǎng)基,添加10%胎牛血清和1%青霉素/鏈霉素(P/S),在37℃、5% CO?的條件下培養(yǎng)
  • 傳代比例:建議1:2至1:4傳代。
  • 凍存條件:60%培養(yǎng)基、30%胎牛血清、10% DMSO,液氮保存。
  • 生物安全等級(jí):BSL-1

特性

  • GM12878細(xì)胞的CYP2C19基因存在一個(gè)堿基突變(G→A),導(dǎo)致異常剪接位點(diǎn)的出現(xiàn),使得該基因的5號(hào)外顯子發(fā)生40 bp缺失,最終導(dǎo)致截短的CYP2C19蛋白失去催化活性。
  • 該細(xì)胞系支原體檢測(cè)為陰性,無(wú)菌操作。

應(yīng)用

GM12878細(xì)胞系在生物醫(yī)學(xué)研究中被廣泛應(yīng)用,特別是在以下領(lǐng)域:
  • 基因組學(xué):用于研究人類(lèi)基因組的結(jié)構(gòu)和功能。
  • 表觀遺傳學(xué):研究基因表達(dá)調(diào)控的表觀遺傳機(jī)制。
  • 免疫學(xué):研究B淋巴細(xì)胞的功能和免疫反應(yīng)。

注意事項(xiàng)

  • 該細(xì)胞系為懸浮細(xì)胞,傳代時(shí)建議使用半換液法,避免直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液
  • 收到細(xì)胞后需進(jìn)行無(wú)菌操作,第一次傳代建議1:2傳代。
  • 僅限于科學(xué)研究,不可用于動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療。

??吉奧藍(lán)圖生命科學(xué)技術(shù)中心是一家專(zhuān)注于生物醫(yī)藥的科研產(chǎn)品研究、開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售的高科技企業(yè)。
??吉奧藍(lán)圖生命科學(xué)技術(shù)中心3000余平,其中有GMP標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室、BSL2和ABSL2級(jí)實(shí)驗(yàn)室可進(jìn)行感染類(lèi)項(xiàng)目研究,SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室可飼養(yǎng)大小鼠5000籠,中心還擁有500余平符合AAALAC認(rèn)證的非人靈長(zhǎng)類(lèi)實(shí)驗(yàn)室,可同時(shí)支持150籠位的猴子相關(guān)研究。
??吉奧藍(lán)圖致力于搭建科研成果與新藥轉(zhuǎn)化的對(duì)接橋梁,以助力產(chǎn)、學(xué)、研、融、轉(zhuǎn)綜合一體的科研創(chuàng)新為核心,借助豐富的技術(shù)積累為資源依托,專(zhuān)注于提供前沿的科研技術(shù)服務(wù),以自身特you的平臺(tái)資源和高價(jià)值硬件設(shè)施相結(jié)合,構(gòu)建出一個(gè)專(zhuān)業(yè)的科研與臨床學(xué)術(shù)服務(wù)平臺(tái)。
??吉奧藍(lán)圖(廣東)生命科學(xué)技術(shù)中心擁有2000㎡的專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)室及yi流的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,開(kāi)展的服務(wù)項(xiàng)目涵蓋細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物模型、分子實(shí)驗(yàn)、基因編輯、病理檢測(cè)、免疫檢測(cè)、生物信息學(xué)數(shù)據(jù)挖掘等生物科研技術(shù)服務(wù),完善的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)可滿(mǎn)足多種科研、臨床需求,并配備有高水平SCI醫(yī)學(xué)論文編輯團(tuán)隊(duì),能夠全fang位、長(zhǎng)效地為您的課題設(shè)計(jì)、實(shí)施保駕護(hù)航。

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??《部分案例數(shù)據(jù)》
??累計(jì)合作單位近1000余家
??助力項(xiàng)目實(shí)施近1000余個(gè)
??助力客戶(hù)發(fā)表文獻(xiàn)1000余篇
??《科研服務(wù)/6大技術(shù)平臺(tái)/一站式解決方案》
??學(xué)科建設(shè)/以需求為導(dǎo)向/提供全fang位的解決方案
??學(xué)術(shù)講座/依托服務(wù)平臺(tái)/建立學(xué)術(shù)轉(zhuǎn)化中心
??科研培訓(xùn)/結(jié)合現(xiàn)場(chǎng)觀摩實(shí)操/提供沉浸式培訓(xùn)方式
??1、動(dòng)物平臺(tái),提供模型定制/藥效測(cè)試/毒理藥理/代養(yǎng)繁殖等
??2、細(xì)胞平臺(tái),細(xì)胞鑒定/增殖/毒性/凋亡/周期/遷移/侵襲等
??3、病理平臺(tái),HE染色/免疫組化/免疫熒光/特殊染色等
??4、檢測(cè)平臺(tái),免疫印跡/免疫沉淀/載體構(gòu)建/定點(diǎn)突變等
??5、編輯平臺(tái),學(xué)術(shù)論文編輯指導(dǎo)/期刊投稿支持,課題申報(bào)、指導(dǎo)等
??6、生信平臺(tái),公共數(shù)據(jù)挖掘/靶點(diǎn)篩選/基因組/轉(zhuǎn)錄組/蛋白組/單細(xì)胞測(cè)序分析等
??《豐富的模型,任你選》
??1、腫瘤模型/呼吸系統(tǒng)疾病模型/骨科疾病模型/泌尿及生殖系統(tǒng)疾病模型
??2、肝臟及消化系統(tǒng)疾病模型/代謝疾病模型/心血管疾病模型/免疫系統(tǒng)疾病模型
??3、皮膚疾病模型/神經(jīng)系統(tǒng)疾病/感染類(lèi)疾病模型/檢測(cè)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)


??細(xì)胞平臺(tái)簡(jiǎn)介》
??公司自成立以來(lái)便一直秉承“精品、專(zhuān)業(yè)、誠(chéng)信、便捷”的宗旨和理念,不斷的開(kāi)拓進(jìn)取,務(wù)實(shí)創(chuàng)新,收錄與典藏了近千種各類(lèi)細(xì)胞株/系,公司細(xì)胞主要來(lái)源ATCC,ECACC,ScienCell, DSMZ, RIKEN,JCRB 等,以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外科研機(jī)構(gòu)建系。
??其中自主研發(fā)建系各類(lèi)示蹤細(xì)胞、耐藥株細(xì)胞、基因敲除細(xì)胞等百余種,客戶(hù)遍及全國(guó)各地的醫(yī)院、高校、藥廠、科研機(jī)構(gòu)等,產(chǎn)品質(zhì)量與技術(shù)支持/服務(wù)體系深受廣大客戶(hù)信任和青瞇。
??目前公司以細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)品為主體,陸續(xù)建立與開(kāi)發(fā)了:細(xì)胞STR檢測(cè)試劑盒、PDX人源腫瘤細(xì)胞異體移植技術(shù)、荷瘤動(dòng)物/特殊疾病動(dòng)物模型、原代細(xì)胞系構(gòu)建、耐藥株篩選、Cas9基因敲除株、示蹤細(xì)胞篩選等新產(chǎn)品和技術(shù)體系,以期為廣大客戶(hù)提供更多更好的科研產(chǎn)品和服務(wù)。
??誠(chéng)為基質(zhì)為本協(xié)為贏,吉奧藍(lán)圖生命科學(xué)技術(shù)中心期待與您的合作……
??細(xì)胞常規(guī)說(shuō)明:
??培養(yǎng)條件:89%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
??凍存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基礎(chǔ)培養(yǎng)液
??細(xì)胞質(zhì)檢情況:不含細(xì)菌、真菌、支原體等微生物污染
??傳代建議:1:2~1:3傳代,2~3天換液1次
??特別提醒:簽收細(xì)胞后,如細(xì)胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快聯(lián)系,以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請(qǐng)務(wù)必重視。
??懸浮細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
??1.如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室
??2.擰松瓶蓋,細(xì)胞瓶豎立培養(yǎng)8h(或過(guò)夜)
??3.待細(xì)胞沉底后吸除上層液體(含碎片殘?jiān)?請(qǐng)小心操作),然后吸取沉底的細(xì)胞層(2ML左右轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶,加入新鮮的完(全)培養(yǎng)基(如細(xì)胞狀態(tài)較差可將血清濃度調(diào)高到15%)繼續(xù)培養(yǎng)
??懸浮細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
??1.將培養(yǎng)瓶/皿中的細(xì)胞重懸混勻
??2.吸取2/3或者一半混勻后的細(xì)胞懸液到新的培養(yǎng)瓶/皿
??3.分別在原瓶/皿和新分瓶的培養(yǎng)瓶/皿加入等量或者2倍的新鮮培養(yǎng)基,使細(xì)胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
??4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況和細(xì)胞密度,定期半量換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存
??貼壁細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
??1.收到細(xì)胞當(dāng)天盡快更換新鮮完(全)培養(yǎng)基,第二天再進(jìn)行消化處理
??2.如果細(xì)胞收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完(全)培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完(全)培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
??3.若出現(xiàn)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)
??貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
??1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加適量0.25%胰(酶)進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間)
??2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰(酶),加6~8ml 完(全)培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
??3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐?全)培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
??4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)17項(xiàng)作或者凍存

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