1, 6-二磷酸果糖(1, 6-Fructose diphosphate)檢測|茁彩生物
1, 6-二磷酸果糖(1, 6-Fructose diphosphate),又稱1, 6-二磷酸果糖。FDP是糖酵解的關(guān)鍵中間產(chǎn)物,由果糖-6-磷酸經(jīng)磷酸果糖激酶(PFK)催化生成,隨后裂解為兩分子三碳糖(磷酸二羥丙酮和甘油醛-3-磷酸)。它是糖酵解調(diào)控點之一,PFK活性受ATP、檸檬酸等變構(gòu)調(diào)節(jié)。
生理意義
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快速供能:FDP在無氧及缺氧環(huán)境下能強化細(xì)胞的糖酵解過程,迅速將血液中的葡萄糖轉(zhuǎn)化為能量,滿足人體的急需。
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心肌保護:FDP能夠改善心肌細(xì)胞能量代謝,增強紅細(xì)胞供氧能力,從而保護心肌免受損傷。它還能增強心臟的泵血功能,恢復(fù)心肌的活力,并進一步改善心功能。
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抗疲勞:FDP能夠加速糖酵解合成ATP,實現(xiàn)快速供能,同時增強機體抗氧化能力,減少自由基生成,從而延緩疲勞的發(fā)生。
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改善微循環(huán):在缺血或缺氧的環(huán)境下,F(xiàn)DP能降低血液的黏度,降低細(xì)胞的脆性,同時增強紅細(xì)胞的韌性及其在毛細(xì)血管中的變形能力。它還能抑制紅細(xì)胞的聚集,提升紅細(xì)胞攜氧的能力,從而促進血紅蛋白與組織間的氧交換,強化缺血組織對氧的利用。
測定方法
酶聯(lián)法:
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原理:利用醛縮酶分解FDP為三碳糖,再通過甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)反應(yīng)生成NADH,檢測340 nm吸光度變化。
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優(yōu)點:操作簡便、成本較低。
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缺點:需排除其他底物干擾。
高效液相色譜(HPLC):
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原理:分離并定量FDP,常與紫外或質(zhì)譜檢測聯(lián)用。
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優(yōu)點:高靈敏度和特異性。
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缺點:設(shè)備昂貴、技術(shù)要求高。
質(zhì)譜法:用于高精度分析,適用于復(fù)雜樣本。
樣本處理
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關(guān)鍵步驟:快速滅活代謝酶(如液氮速凍、高氯酸提?。乐笷DP降解。
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樣本類型:
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血液:離心分離血漿/紅細(xì)胞,避免溶血。
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組織:勻漿后離心取上清液。
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細(xì)胞培養(yǎng)液:直接離心收集細(xì)胞。
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