一、背景

兔血清是采用健康兔的血液為原料，經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過(guò)濾后制成的一種生物試劑。它的主要成分為血漿中除去纖維蛋白后分離出的淡黃色透明液體，具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。兔血清的性狀為澄清液體，無(wú)噬菌體，內(nèi)毒素低，無(wú)溶血、無(wú)異物、無(wú)菌、無(wú)支原體等，因此，它被廣泛用于生化相關(guān)科研試驗(yàn)。

二、特點(diǎn)

兔血清對(duì)兔來(lái)源的細(xì)胞在增殖性能和凍存存活率方面均優(yōu)于胎牛血清,適宜兔源組織的培養(yǎng)。

三、使用方法

使用時(shí)，用PBS（0.01mol/LpH7.2-7.4）將封閉血清原液稀釋10或20倍，配成10%或者5%的工作液，直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上，37℃度孵育10-30分鐘，清除血清，勿洗，滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過(guò)夜。

四、作用

兔血清的主要作用是提供有利于細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所需的各種生長(zhǎng)因子和激素。生長(zhǎng)因子包括胰島素，胰島素樣生長(zhǎng)因子，表皮生長(zhǎng)因子，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子，血小板衍生生長(zhǎng)因子等。

五、具體來(lái)說(shuō)，兔血清在多個(gè)領(lǐng)域有重要應(yīng)用

1、細(xì)胞培養(yǎng)：兔血清可以作為細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分，為細(xì)胞提供必要的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。

2、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)：兔血清可用于制備抗體、抗原等免疫學(xué)試劑，以及用于免疫沉淀、免疫熒光等實(shí)驗(yàn)，有助于研究免疫系統(tǒng)的功能和機(jī)制。

3、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)：在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，兔血清可用于酶活性測(cè)定、蛋白質(zhì)定量、核酸分析等，幫助科研人員了解生物體內(nèi)的生物化學(xué)過(guò)程和機(jī)制。

4、藥理學(xué)和毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)：兔血清也可用于藥物代謝、藥物動(dòng)力學(xué)等藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)，以及用于檢測(cè)毒物對(duì)生物體的影響，如毒性、致畸性等。

兔血清的儲(chǔ)存條件通常為-15℃～-20℃，有效期一般為五年。為確保其質(zhì)量和穩(wěn)定性，在使用過(guò)程中應(yīng)遵循相關(guān)操作規(guī)程和注意事項(xiàng)。

需要注意的是，不同來(lái)源的兔血清可能存在差異，因此在選擇和使用兔血清時(shí)需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇和優(yōu)化。此外，由于兔血清中含有多種成分，可能會(huì)對(duì)某些細(xì)胞產(chǎn)生不良影響，因此在使用時(shí)需要謹(jǐn)慎評(píng)估其對(duì)細(xì)胞的影響。

六、應(yīng)用

兔血清可以用于針刀療法對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13濃度的影響：

觀察針刀治療后KOA模型兔血清中MMP-3和MMP-13濃度的變化,進(jìn)而初步探討針刀療法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制。研究目的大量臨床研究顯示針刀療法是有效治療膝骨關(guān)節(jié)炎的方法之一,本研究通過(guò)觀察針刀治療后膝骨關(guān)節(jié)炎兔模型血清中MMP-3和MMP-13含量變化的影響,以初步探討MMPs與骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)系,從而闡述針刀療法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制,為針刀松解法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

研究方法將48只健康清潔6月齡新西蘭家兔(雌雄各半,體重2.25±0.1kg)隨機(jī)分為4組,每組各12只,四組分別為空白組、模型組、針刀組和電針組?？瞻捉M不參加造模,其余三組采用左后肢伸直位固定制動(dòng)法制備實(shí)驗(yàn)性膝骨關(guān)節(jié)炎家兔模型。模型組不進(jìn)行干預(yù),針刀組每周干預(yù)治療1次,電針組每周干預(yù)3次,兩組均干預(yù)3周。干預(yù)結(jié)束3周后,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)模型兔血清中MMP-3和MMP-13的濃度,分析針刀松解法對(duì)血清中MMPs含量的影響。研究結(jié)果在針刀和電針治療前和治療后,分別對(duì)模型組、針刀組和電針組實(shí)驗(yàn)兔用改良Lequesne MG評(píng)估方法進(jìn)行行為學(xué)觀察。

結(jié)果顯示治療前3組行為學(xué)評(píng)分值沒(méi)有顯著差異(P>0.05),治療后,針刀組、電針組與模型組相比分值明顯下降,差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。ELISA檢測(cè)兔KOA血清中MMP-3、MMP-13水平的結(jié)果表明：模型組血清中MMP-3、MMP-13含量明顯增加,與其它組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；針刀組血清中MMP-3、MMP-13含量顯著降低,與模型組及電針組相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

研究結(jié)論針刀療法能夠降低膝骨關(guān)節(jié)炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13的濃度,因此針刀療法能減少軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的降解,抑制關(guān)節(jié)軟骨的破壞,控制軟骨的退行性改變,達(dá)到改善膝骨關(guān)節(jié)炎的癥狀、治療KOA的作用。

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