你以為細胞在培養(yǎng)皿里只是"躺平"？錯！它們可是妥妥的"美食家"。血清——來自血液的黃金液體，就是細胞的滿漢全席！

Section.01

血清: 細胞的“五星級外賣”

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體。

血清核心作用有哪些?

首先，血清可謂細胞食堂！氨基酸、葡萄糖、維生素、脂質(zhì)、微量元素……營養(yǎng)直接拉滿，細胞干飯不擺爛！

血清還是貼壁神器！纖維連接蛋白、層粘連蛋白等——貼壁細胞的“強力膠”，防止細胞“躺平變圓” (拒絕 996，但貼壁必須穩(wěn))。

當然，血清還是實驗 Buff：病毒培養(yǎng)、雜交瘤存活、凍存保護……血清在手，科研不愁！

細胞的“米其林廚房”如何煉成?

血清生產(chǎn)流程：血液采集 → 凝固分離 → 三級過濾 → 質(zhì)檢分裝 → 冷鏈配送。

圖 1. 血清生產(chǎn)流程圖。

Section.02

質(zhì)檢內(nèi)-幕:

血清屆的“魔鬼面試”

你以為血清隨便就能上崗？它可是要過五關斬六將！涵蓋質(zhì)量監(jiān)控、微生物驗證、生化檢測等諸多環(huán)節(jié)。當然，實踐出真知！經(jīng)過客戶實踐驗證的血清才是好血清~

血清的質(zhì)量檢測

血清的客戶驗證

表 1. 文獻研究中的血清使用及培養(yǎng)參考。

實驗驗證 1：趨化實驗

實驗細胞株：THP -1 cells

培養(yǎng)基：RPMI 1640 +10% FBS +1% P/S

細胞密度：1.5×105 個/孔

培養(yǎng)時間：4 h

實驗結(jié)果：Mouse MCP-1 有促進 THP-1 細胞正向定向遷移，且呈現(xiàn)出濃度依賴性。

圖 2. 探究 Mouse MCP-1 對 THP -1 趨化的影響。

實驗驗證 2：細胞生長

實驗細胞株：SH-SY5Y cells

培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基 +15% FBS +1% P/S

細胞密度：4.5×103 個/孔

培養(yǎng)時間：48 h

實驗結(jié)果：Human Neurofascin 可以促進 SH-SY5Y 細胞突觸延伸。

圖 3. 探究 Human Neurofascin 對 SH-SY5Y 細胞突觸的影響。

實驗驗證 3：劃痕實驗

實驗細胞株：AGS cells

培養(yǎng)基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S

細胞密度：2×106 個/孔

培養(yǎng)時間：24 h

實驗結(jié)果：Human GRIK 抑制 AGS 細胞的損傷后的“愈合”作用。

圖 4. 探究 Human GRIK2 對 AGS 細胞運動的影響。

實驗驗證 4：細胞增殖實驗

實驗細胞株：Balb/3T3 cells

培養(yǎng)基：DMEM +10% FBS

細胞密度：3×103 個/孔

培養(yǎng)時間：48 h

檢測試劑：CCK8

實驗結(jié)果：Human Amphiregulin 可以促進 Balb/3T3 細胞的增殖，ED50=14.39 ng/mL。

圖 5. 探究 Human Amphiregulin 對 Balb/3T3 細胞增殖的影響。

實驗驗證 5：Transwell 遷移實驗

實驗細胞株：PC-3 cells

培養(yǎng)基：Ham's F-12 + 10% FBS +1% P/S

細胞密度：7×104 個/孔

培養(yǎng)時間：24 h

實驗結(jié)果：Human Androgen receptor 抑制 PC-3 細胞的遷移，隨著濃度增加，遷移呈現(xiàn)負趨勢。

圖 6. 探究 Androgen receptor 對 PC-3 細胞遷移的影響。

MCE 血清在各細胞系中的驗證

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靈魂拷問:

血清使用的終-極難題

1. 血清應該如何保存？

經(jīng)常使用的血清分裝后保存在 -20℃ 即可，長期保存建議保存在 -80℃。反復凍融會導致血清有沉淀析出，建議將大規(guī)格血清分裝成單次使用規(guī)格后保存，按需取用。

低溫保存，拒絕反復凍融?。?！

2. 血清應該如何解凍？

解凍時需要從低溫中取出后，放置于 2-8℃ 冰箱中緩慢解凍，在溶解過程中避免劇烈震蕩，可隔一段時間，緩慢晃動，混合溶解成分并加速溶解過程。不可將血清直接從低溫拿到室溫/25-37℃ 環(huán)境中溶解，巨大的溫度變化容易使血清產(chǎn)生絮狀沉淀，且長時間放置在室溫/25-37℃ 環(huán)境中，容易使血清中活性物質(zhì)發(fā)生變化，影響細胞生長等。

緩慢升溫，拒絕暴力搖晃?。。?/span>

3. 血清溶解后的沉淀是什么？

血清中出現(xiàn)的沉淀物質(zhì)可能包括纖維蛋白 (絮狀沉淀)、脂蛋白、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白、磷酸鈣與草酸鈣 (顯微鏡下小黑點沉淀) 及膽固醇等。

4. 血清在使用之前需要再次過濾？

血清在生產(chǎn)過程中嚴格執(zhí)行三級過濾 (0.1 μm)，標準的無菌操作，不建議在使用前再次過濾，再次過濾可能會導致血清中營養(yǎng)物質(zhì)減少。

5. 血清在使用前是否需要熱滅活？

熱滅活是指在 56℃，30 min 處理已經(jīng)完-全解凍的血清，熱滅菌可以使血清中的補體去活化。熱滅活血清對于細胞生長只有微小的促進作用或者沒有作用，但通常會導致細胞生長速度慢，血清中 沉淀物顯著增多等問題。非必要，不建議熱滅活。

6. 我要替換我現(xiàn)在使用的血清，應該怎么操作呢？

細胞對于日常培養(yǎng)條件具有適應性，貿(mào)然打破會導致它不適應新的生活環(huán)境，需要先進行馴化。建議復蘇細胞使用原品牌血清，傳代 1-2 代，細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，新血清：原血清=1:3 進行第一次換液，新血清逐代提高至 50%，75%，100%，過程注意監(jiān)控細胞狀態(tài)，穩(wěn)定情況下傳代，且需要保持較高的傳代密度。

Tips：文末彩蛋~細胞培養(yǎng)的哲學

細胞如頂流明星，血清是獨-家營養(yǎng)師——科研圈沒有“湊合”的容身之地，只有“硬核”的生存法則！

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小結(jié)

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參考文獻：

[1] Yang J,et al. VSTM2L protects prostate cancer cells against ferroptosis via inhibiting VDAC1 oligomerization and maintaining mitochondria homeostasis. Nat Commun. 2025 Jan 29;16(1):1160.

[2] Han H, et al. Therapeutic potential of monomethyl fumarate and aluminum ion combination in alleviating inflammation and oxidative stress in psoriasis. Redox Biol. 2025 Feb;79:103482.