Nexcelom Cellometer--SD100 細(xì)胞計(jì)數(shù)板用戶指南
Nexcelom Cellometer--SD100 細(xì)胞計(jì)數(shù)板用戶指南
摘要:本指南旨在為科研人員提供Nexcelom Cellometer--SD100細(xì)胞計(jì)數(shù)板的全面使用指導(dǎo)。介紹了產(chǎn)品基本信息、原理、應(yīng)用場景、操作步驟、注意事項(xiàng)及性能參數(shù),助力科研人員高效、準(zhǔn)確地進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)。
關(guān)鍵詞:Nexcelom Cellometer--SD100;細(xì)胞計(jì)數(shù)板;細(xì)胞計(jì)數(shù);用戶指南
一、引言
在細(xì)胞生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域,細(xì)胞計(jì)數(shù)是一項(xiàng)基礎(chǔ)且重要的實(shí)驗(yàn)操作。準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)對于細(xì)胞培養(yǎng)、藥物篩選、疾病研究等眾多科研工作都具有關(guān)鍵意義。Nexcelom Cellometer--SD100細(xì)胞計(jì)數(shù)板憑借其高精度、便捷性和兼容性等優(yōu)勢,成為科研人員常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具。本文將詳細(xì)介紹該產(chǎn)品的相關(guān)信息,以幫助用戶更好地使用。
二、產(chǎn)品概述
(一)基本信息
品牌:Nexcelom
產(chǎn)品名稱:Cellometer--SD100細(xì)胞計(jì)數(shù)板
貨號:CHT4-SD100-002
規(guī)格:75片/盒
包裝:每張載玻片兩側(cè)均貼有保護(hù)膜,使用前需撕除
有效期:自生產(chǎn)之日起1年
儲(chǔ)存條件:室溫保存
(二)產(chǎn)品原理
Nexcelom Cellometer--SD100細(xì)胞計(jì)數(shù)板采用標(biāo)準(zhǔn)厚度的計(jì)數(shù)腔室,可容納直徑為5至80微米的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞懸液滴加在蓋片邊緣后,利用液體的表面張力使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間。通過顯微鏡觀察計(jì)數(shù)區(qū)的細(xì)胞,根據(jù)特定公式計(jì)算細(xì)胞濃度。
三、產(chǎn)品特點(diǎn)
(一)高通量計(jì)數(shù)
每張載玻片可進(jìn)行兩個(gè)樣本的計(jì)數(shù),一盒75片可容納150個(gè)計(jì)數(shù),滿足大量樣本的計(jì)數(shù)需求,提高實(shí)驗(yàn)效率。
(二)兼容性強(qiáng)
兼容除Cellometer Ascend外的所有Cellometer系列儀器,如Cellometer K2熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、Cellometer Spectrum圖像細(xì)胞分析系統(tǒng)、Cellometer X2等,方便用戶根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)設(shè)備進(jìn)行選擇。
(三)操作簡便
一次性使用的所有塑料細(xì)胞計(jì)數(shù)室,無需清洗,避免了交叉污染,且操作步驟相對簡單,降低了實(shí)驗(yàn)難度。
(四)精度高
標(biāo)準(zhǔn)厚度的腔室設(shè)計(jì),能夠準(zhǔn)確容納規(guī)定直徑范圍的細(xì)胞,保證計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
四、應(yīng)用場景
(一)細(xì)胞培養(yǎng)監(jiān)測
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,定期使用該細(xì)胞計(jì)數(shù)板對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),可以了解細(xì)胞的生長狀態(tài)、增殖情況,為細(xì)胞傳代、換液等操作提供依據(jù)。
(二)藥物篩選
在藥物篩選實(shí)驗(yàn)中,需要對不同藥物處理后的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),以評估藥物對細(xì)胞生長的影響。Nexcelom Cellometer--SD100細(xì)胞計(jì)數(shù)板能夠快速、準(zhǔn)確地提供細(xì)胞數(shù)量信息,有助于篩選出有效的藥物。
(三)疾病研究
在疾病研究中,如腫瘤研究,需要對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和分析。該細(xì)胞計(jì)數(shù)板可以用于檢測腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡等情況,為疾病的發(fā)病機(jī)制研究和治療策略制定提供數(shù)據(jù)支持。
五、操作步驟
(一)準(zhǔn)備工作
檢查細(xì)胞計(jì)數(shù)板的有效期和包裝完整性,確保產(chǎn)品未過期且無損壞。
準(zhǔn)備好待測的細(xì)胞懸液,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要對細(xì)胞懸液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?,以保證細(xì)胞在計(jì)數(shù)范圍內(nèi)。
準(zhǔn)備好顯微鏡和相關(guān)儀器,確保其處于正常工作狀態(tài)。
(二)撕除保護(hù)膜
使用前,小心撕去載玻片兩側(cè)的保護(hù)膜,避免保護(hù)膜殘留影響檢測精度。
(三)加樣
嚴(yán)格按照20μl體積將細(xì)胞懸液加到蓋玻片邊緣,使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間。注意加樣量不宜過多,以免腔室溢流;也不宜過少,以免填充不足影響計(jì)數(shù)結(jié)果。
(四)靜置
加樣后,靜置3分鐘,使細(xì)胞沉降到計(jì)數(shù)板上,不再隨液體漂移。
(五)顯微鏡觀察與計(jì)數(shù)
將細(xì)胞計(jì)數(shù)板放置于顯微鏡的載物臺(tái)上夾穩(wěn)。
先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)區(qū),再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察。由于生活細(xì)胞的折光率和水的折光率相近,觀察時(shí)應(yīng)減弱光照的強(qiáng)度。
計(jì)算板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計(jì)左側(cè)和上方的。按照公式計(jì)算細(xì)胞濃度:細(xì)胞數(shù)/mL = 四大格細(xì)胞總數(shù) / 4 × 10?。公式中除以4是因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù),乘以10?是因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)= 0.1mm3,而1ml = 1000mm3。
(六)記錄結(jié)果
將計(jì)算得到的細(xì)胞濃度記錄下來,以便后續(xù)分析和使用。
六、注意事項(xiàng)
(一)樣本處理
確保細(xì)胞懸液充分混勻,避免出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)影響計(jì)數(shù)結(jié)果。鏡下偶見有兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算;若細(xì)胞團(tuán)10%以上,說明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液。
根據(jù)細(xì)胞濃度適當(dāng)稀釋樣本,以保證細(xì)胞在計(jì)數(shù)范圍內(nèi)。
(二)加樣操作
加樣量要準(zhǔn)確,一般為20μl,避免腔室溢流或填充不足。
加樣時(shí)要使懸液充滿蓋片和計(jì)數(shù)板之間,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
(三)顯微鏡觀察
遵循“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右”的原則進(jìn)行計(jì)數(shù),避免重復(fù)計(jì)數(shù)和漏記。
對于出芽的酵母菌,芽體達(dá)到母細(xì)胞大小一半時(shí),即可作為兩個(gè)菌體計(jì)算。
(四)儀器兼容性
該細(xì)胞計(jì)數(shù)板不適用于Cellometer Ascend型號儀器,需選用其他兼容型號(如K2、Spectrum或X2)。
(五)儲(chǔ)存與使用
有效期為生產(chǎn)日期后1年,請查看紙盒外部的有效期標(biāo)識,根據(jù)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃合理采購,避免庫存積壓。
加載樣本前務(wù)必撕去載玻片兩側(cè)的保護(hù)膜,避免影響檢測精度。
七、性能參數(shù)
(一)檢測點(diǎn)數(shù)
每張載玻片可進(jìn)行兩個(gè)樣本的計(jì)數(shù),一盒75片可容納150個(gè)計(jì)數(shù)。
(二)兼容細(xì)胞尺寸
可容納直徑為5至80微米的細(xì)胞。
(三)儀器兼容性
兼容除Cellometer Ascend外的所有Cellometer系列儀器,如Cellometer K2熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、Cellometer Spectrum圖像細(xì)胞分析系統(tǒng)、Cellometer X2等。
(四)樣品體積
每次加樣體積為20μl。
八、結(jié)論
Nexcelom Cellometer--SD100細(xì)胞計(jì)數(shù)板是一款性能優(yōu)良、操作簡便的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具。通過遵循本用戶指南中的操作步驟和注意事項(xiàng),科研人員可以準(zhǔn)確地完成細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn),為科研工作提供可靠的數(shù)據(jù)支持。希望本指南能夠幫助用戶更好地使用該產(chǎn)品,提高實(shí)驗(yàn)效率和質(zhì)量。
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