凝膠色譜儀技術(shù)探秘:從原理到優(yōu)勢(shì)的全面解讀
在材料科學(xué)、化學(xué)、生物工程等諸多領(lǐng)域,凝膠色譜儀都是的分析利器。它基于的分離原理,展現(xiàn)出顯著優(yōu)勢(shì)。
凝膠色譜儀的核心原理是體積排除機(jī)理。其內(nèi)部裝填的多孔性凝膠或微粒,孔徑大小與待分離的聚合物分子相近。當(dāng)樣品溶液流經(jīng)色譜柱時(shí),體積大的高分子化合物無法進(jìn)入凝膠孔,會(huì)最先從凝膠粒間流出,淋出體積(時(shí)間)最小;而小分子化合物能從填料孔中穿過,行程相對(duì)較長,會(huì)較晚流出。如此,高聚物依分子量從大到小依次被淋出,通過已知分子量高分子聚合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線,就能分析同系未知待測(cè)高分子化合物。
凝膠色譜儀的優(yōu)勢(shì)十分突出。首先,它不受樣品極性影響,能有效分離色譜柱難以分開的樣品,像脂肪類、蛋白及色素類大分子干擾物,在生物源樣品中含量高且對(duì)色譜柱和進(jìn)樣口有潛在危害,使用凝膠色譜儀凈化十分必要。其次,操作簡(jiǎn)便,設(shè)備簡(jiǎn)單,甚至僅需一根色譜柱即可工作,且重復(fù)性高,凝膠可反復(fù)使用,回收率接近100%。再者,凝膠為化學(xué)惰性,不帶電荷,吸附力弱,分離條件緩和,分離過程不涉及化學(xué)鍵變化,不會(huì)影響分子生物學(xué)活性,對(duì)分離物的活性無不良影響。
此外,凝膠色譜儀分離的分子量范圍寬,廣泛應(yīng)用于各種生化物質(zhì)的分離純化、脫鹽、濃縮、去熱原和脫色,以及分析測(cè)定等,為科研和工業(yè)生產(chǎn)提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。
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