熒光素直接標(biāo)記的一抗（直接免疫熒光法）

                                             試劑準(zhǔn)備：
    1.準(zhǔn)備熒光標(biāo)記的一抗和同型對照抗體
    2.細(xì)胞洗液：含有2%BSA（牛血清白蛋白）、0.1%疊氮鈉的PBS.
    3.固定液：1%多聚甲醛PBS液（pH7.2）pH值一定要準(zhǔn)確，否則會影響檢測結(jié)果。
                   操作方法：
    1.每個樣品取2支流式檢測管，分別注明同型對照和待測，兩管分別加入10^6-7/100μl個待側(cè)細(xì)胞（若細(xì)胞濃度低或加入的細(xì)胞懸液較多，可1200轉(zhuǎn)/每分鐘，10分鐘低溫離心，棄上清，保證100μl被檢樣品）。
    2.同型對照管中加入熒光標(biāo)記同型對照抗體，做陰性對照；待測管中加入熒光標(biāo)記的一抗，作為實驗管，各加30μl （按抗體使用說明書，一抗可做選擇幾個梯度1：20、50、100倍稀釋）混勻即可。
    3. 4℃度孵育30分鐘，加入細(xì)胞洗液，1200轉(zhuǎn)/每分鐘，10分鐘低溫離心，反復(fù)2次。
    4.去除上清，控干，加入固定液0.5ml,混勻。
    5.上機檢測，先做同型對照，調(diào)整電壓至陰性區(qū)范圍，再測實驗管即可。