色譜法(Chromatography,把混合物分離成單組分的方法)又稱色層法、層析法、層離法等,系指把混合物分離成為單組分的一種分離分析方法。是一種重要的分離分析技術(shù)和物化研究方法,由于具有分離效能好、分析速度快、檢測(cè)靈敏度高、適用范圍廣和操作簡便等特點(diǎn),因此在生產(chǎn)、科研、教學(xué)等的眾多領(lǐng)域中得到了廣泛應(yīng)用,特別是與計(jì)算機(jī)系統(tǒng)聯(lián)用以來,它已成為分析測(cè)試和分離提純*的手段。
色譜法的分離原理是利用混合物中各組分在流動(dòng)相和固定相中具有不同的溶解-解析能力、吸附-脫附能力,或其他親和作用力的差異,當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),樣品各組分在兩相中反復(fù)多次(≥103次)受到上述各種作用力的作用,從而使混合物各組分獲得互相分離。
當(dāng)樣品(例如含A、B兩組分的混合物)進(jìn)入色譜柱頭以后,流動(dòng)相把樣品帶入色譜柱內(nèi),剛進(jìn)入柱子時(shí),組分A和B以混合譜帶出現(xiàn)。
由于各組分在固定相中的溶解-解析、或吸附-脫附、或其他親和作用力的差異,各組分在色譜柱中的滯留時(shí)間也就不同,即它們?cè)谥械倪\(yùn)行速度不同。隨著流動(dòng)相的不斷流過,組分在柱中兩相間經(jīng)過了反復(fù)多次的分配和平衡過程,當(dāng)運(yùn)行一定的柱長以后,樣品中各組分得到了分離。當(dāng)組分A離開色譜柱出口流過檢測(cè)器時(shí),記錄設(shè)備就記錄出組分A的色譜峰;繼之當(dāng)組分B離開色譜柱流過檢測(cè)器時(shí),記錄設(shè)備就記錄出組分B的色譜峰。
由于色譜柱中存在著渦流擴(kuò)散、分子擴(kuò)散(縱向擴(kuò)散)、傳質(zhì)阻力以及其他因素的作用,使得所記錄的色譜峰并不是以一條矩形的譜帶出現(xiàn),而是一條接近高斯分布曲線的色譜峰。
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