如何解決色譜柱使用過程出現(xiàn)的問題
　　
　　問題:
　　
　　不同色譜柱間差異
　　
　　使用期間柱變化
　　
　　原因:
　　
　　填料、鍵合相不同
　　
　　柱床破壞
　　
　　鍵合相丟失
　　
　　硅膠基質(zhì)溶解
　　
　　強(qiáng)保留組分堆積堵塞
　　
　　表現(xiàn):
　　
　　保留因子（k），分離因子（α）
　　
　　柱效（N）
　　
　　保留因子（k），分離因子（α）
　　
　　柱效（N）
　　
　　保留因子（k），柱效（N）
　　
　　問題:
　　
　　柱外效應(yīng)
　　
　　原因:
　　
　　系統(tǒng)差異、進(jìn)樣量大、進(jìn)樣閥與色譜柱之間、色譜柱與檢測(cè)器之間的管路太長、檢測(cè)器流通池體積大、接頭死體積大等。
　　
　　表現(xiàn):
　　
　　柱效（N）
　　
　　問題:
　　
　　分離效果變差
　　
　　原因:
　　
　　流動(dòng)相組分改變
　　
　　流速改變
　　
　　溫度改變
　　
　　表現(xiàn):
　　
　　保留因子（k），柱效變化很小
　　
　　保留因子（k），分離因子（α）
　　
　　保留因子（k），柱效變化很小
　　
　　問題:
　　
　　柱平衡慢
　　
　　原因:
　　
　　重新平衡時(shí)間不夠
　　
　　柱超載樣品量太大
　　
　　表現(xiàn):
　　
　　保留因子（k），柱效變化很小
　　
　　保留因子（k），柱效（N）
　　
　　造成色譜峰（不對(duì)稱）拖尾的原因
　　
　　1．色譜柱本身填裝問題,篩板堵塞或填料塌陷；
　　
　　2．柱頭有污染；
　　
　　3．樣品超載；
　　
　　4．樣品溶劑不合適；
　　
　　5．柱外效應(yīng)；
　　
　　6．化學(xué)或二次保留（硅羥基）效應(yīng)；
　　
　　7．緩沖容量不足或不合適；
　　
　　8．重金屬污染。
　　
　　如何解決峰形拖尾的問題
　　
　　A.與化學(xué)有關(guān)的拖尾問題
　　
　　1．流動(dòng)相中，加入30mM的三乙胺（用于堿性化合物）或醋酸胺（用于酸性化合物），未知化合物加醋酸三乙胺；
　　
　　2．如仍然拖尾，將三乙胺換為二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）；
　　
　　3.降低進(jìn)樣量至<1μg。
　　
　　B.與色譜柱有關(guān)的拖尾問題
　　
　　1.如柱頭處有強(qiáng)保留的樣品組分積聚，反相柱可用20倍柱體積的96%的二氯甲烷與4%甲醇，加1%氫氧化銨混合液沖洗；正向柱可用甲醇沖洗；
　　
　　2.使用保護(hù)柱。
　　
　　C.與HPLC系統(tǒng)有關(guān)的峰拖尾和峰加寬
　　
　　1.進(jìn)樣體積過大，（通常≤25μL）；
　　
　　2.進(jìn)樣閥與色譜柱及檢測(cè)器之間的管路體積過大（*連接管應(yīng)<20cm，內(nèi)徑為0.007"）；
　　
　　3.檢測(cè)器流通池的體積過大。
　　
　　慧德易公司*代理DEVELOSIL、Chisso公司的色譜柱及色譜耗材產(chǎn)品；
　　
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