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高速逆流色譜儀的優(yōu)勢
高速逆流色譜（high-speed countercurrent chromatography，簡稱HSCCC） 是一種較新型的液—液分配色譜,由美國國立健康研究院（National Institute of Health, U.S.A.）Ito博土zui先研制開發(fā)后由北京市新技術(shù)應(yīng)用研究所在國內(nèi)開展研發(fā)和推廣工作。其原理是基于樣品在旋轉(zhuǎn)螺旋管內(nèi)的互不混溶的兩相溶劑間分配不同而獲得分離，因而無須任何固體載體或支撐體，能達(dá)到在短時間內(nèi)實現(xiàn)分離和制備，并且可以達(dá)到幾千個理論塔板數(shù)。與其他柱色譜相比較，它克服了固定相載體帶來的樣品吸附、損失、污染和峰形施尾等缺點[3]。目前此項技術(shù)已被應(yīng)用于生化、生物工程、醫(yī)藥、天然產(chǎn)物化學(xué)、有機合成、環(huán)境分析、食品、地質(zhì)、材料等領(lǐng)域[5]。我國是繼美國、日本之后zui早開展逆流色譜應(yīng)用的國家，俄羅斯、法國、英國、瑞士等國也都開展了此項研究。美國FDA及世界衛(wèi)生組織（WHO）都引用此項技術(shù)作為抗生素成分的分離檢定，90年代以來，高速逆流色譜被廣泛地應(yīng)用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。
1. 高速逆流色譜儀原理及特點
HSCCC利用了一種特殊的流體動力學(xué)（單向流體動力學(xué)平衡）現(xiàn)象。具體表現(xiàn)為一根100多米長的螺旋空管，注入互不相溶的兩相溶劑中的一相作為固定相，然后作行星運動；同時不斷注入另一相（流動相），由于行星運動產(chǎn)生的離心力場使得固定相保留在螺旋管內(nèi)，流動相則不斷穿透固定相；這樣兩相溶劑在螺旋管中實現(xiàn)的接觸、混合、分配和傳遞。由于樣品中各組分在兩相中的分配比不同，因而能使樣品中各組分得到分離。
2. HSCCC的優(yōu)點
HSCCC主要具有以下幾個方面的優(yōu)點。
2.1 應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)性好。由于溶劑系統(tǒng)的組成與配比可以是無限多的，因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離，所以在分離天然化合物方面具有其獨到之處。并因不需固體載體，而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現(xiàn)象，特別適用于分離極性物質(zhì)和其它具有生物活性的物質(zhì)。
2.2 操作簡便，容易掌握。分離過程中對樣品的前處理要求低，僅需一般的粗提物即可進(jìn)行HSCCC的制備分離或分析。
2.3 回收率高。由于沒有固體載體，不存在吸附、降解和污染，理論上樣品的回收率可達(dá)100％。在實驗中只要調(diào)整好分離條件，一般都有很高的回收率。
2.4 重現(xiàn)性好。如果樣品不具有較強的表面活性作用，酸堿性也不強，那么多次進(jìn)樣，其分離過程穩(wěn)定性都保持很好、峰的保留相對標(biāo)準(zhǔn)偏差也小于2%，重現(xiàn)性相當(dāng)好。
2.5 分離效率高，分離量較大。由于其與一般色譜的分離方式不同，能實現(xiàn)梯度操作和反相操作、亦能進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣，使其特別適用于制備性分離，產(chǎn)品純度高。研究結(jié)果表明:一臺普通的高速逆流色譜儀一次進(jìn)樣可達(dá)幾十毫升，一次可分離近10g的樣品。因此，在80年代后期被廣泛地應(yīng)用于植物化學(xué)成分的分離制備研究
北京艾美林科技有限公司
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