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為什么選擇ELISPOT?

來源:北京博蕾德國際貿(mào)易有限公司   2013年06月17日 11:07  

ELISPOT斑點酶聯(lián)免疫分析使細胞因子分泌過程更加形象。因為細胞因子圍繞在細胞周圍,在被上清液稀釋之前,會和鄰近細胞表面的受體結(jié)合,或者降解。細胞因子和GranzemyB ELISPOT實驗是zui有效的體外監(jiān)控CD4或CD8T細胞抗原的方法。通過測定單個細胞因子信號及其頻率,可以建立具有不同集落大小的特殊T細胞庫。

ELISPOT實驗檢測細胞因子的*優(yōu)勢
 ☆從1到10,000,000,可以測量體外細胞因子的分泌頻率,和ELISA以及四聚體染色、細胞內(nèi)細胞因子染色相比,具有靈敏度高、特異性好的特點。提高靈敏度非常關(guān)鍵,因為體內(nèi)產(chǎn)生抗原特異性T細胞的頻率非常低。

 

?☆大批量細胞分析:可以分析上百個樣品,檢測多種抗原。

?☆所需細胞濃度低。和其他試驗方法相比,ELISPOT方法對細胞濃度沒有太高的要求,比如,檢測600中不同的抗原或肽段只需要45ml血。

?☆可以確定CD4或者CD8抗原決定簇。因為實驗所需細胞量少,實驗靈敏,所有ELISPOT對于決定簇圖譜的繪制,肽段文庫的篩選是的選擇。
☆可以建立抗原特異性T細胞親和函數(shù)

?☆可以研究未經(jīng)藥物處理過的T細胞的實際細胞因子分泌過程,T細胞分泌物下降,則說明T細胞產(chǎn)量減低或者單個細胞分泌功能下降。

?☆ELISPOT不破壞淋巴細胞活性,可以繼續(xù)進行細胞克隆以及低溫儲藏研究
?☆低溫存藏的人淋巴細胞可以繼續(xù)保持生物學活性,可以重復實驗步驟。

ELISPOT是現(xiàn)今研究T細胞功能,進行T細胞診斷zui有力的工具,ELISPOT的研究已經(jīng)成為一門科學。

ELISPOT分析儀草案
在病理學教授Paul V. Lehmann博士帶領(lǐng)下,眾多學者共同在CWRU大學通過了新一代ELISPOT分析儀的認證。 zui初ELISPOT是為了檢測B細胞分泌抗體而問世的,因為T細胞分泌細胞因子而B細胞產(chǎn)生抗體,新一代的ELISPOT增加了檢測T細胞分泌細胞因子的功能。

ELISPOT分析具有性、客觀性,可重復性以及自動化特點,改變了以往ELISA的耗時,結(jié)果不客觀的缺點。

ELISPOT分析儀的出現(xiàn)解決了以下問題
?☆哪些斑點是抗原特異性T細胞產(chǎn)生的(此斑點具有進一步分析價值),哪些是無關(guān)細胞產(chǎn)生的(此斑點沒有T細胞研究價值)
?☆斑點大小的意義
?☆在對不同細胞因子計數(shù)和分析時,如何定義斑點zui大和zui小尺寸

?☆如何從單個細胞基礎(chǔ)上分析

?☆實驗度有多高?如果一個細胞產(chǎn)生相似的細胞因子,在多大程度上會干擾分析結(jié)果?

?☆幾次重復實驗才能使結(jié)果更有意義?

ELISPOT:世界*科學家辛勤勞動的果實
 

ELISPOT分析儀的zui初研究在CWEU大學開始,由26名工作人員,15個科研工作者,和許多來自BD、Pharmingen的科學工作者共同努力下研制成功的,為此CTL也成為美國國立衛(wèi)生院免疫耐受網(wǎng)絡(luò)(ITN)的參考實驗室,專門對各種ELISPOT臨床試驗結(jié)果進行測試。

 

經(jīng)科學認證的ELISPOT分析儀包括三個分析模式,適用于客戶不同的消費水平、研究目的、外圍設(shè)備,附屬軟件和數(shù)據(jù)處理方法。另外,CTL提供圖像分析服務(wù),ELISPOT有自己的網(wǎng)上實驗室,可以提供網(wǎng)絡(luò)培訓以及為臨床試驗項目按照合同約定提供研究服務(wù)。

EILISPOT:科學革命

自從CTL發(fā)起ELISPOT革命以來,很多人在借鑒我們的成功經(jīng)驗。作為創(chuàng)始人,CTL致力于開創(chuàng)ELISPOT新方法并將其提高到科學的高度。
 

 

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