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徠卡共聚焦顯微鏡的故障排除

來(lái)源:北京悅昌行科技有限公司   2013年08月20日 09:54  

 徠卡共聚焦顯微鏡的故障排除

 
在某些實(shí)驗(yàn)過(guò)程可能不明原因的無(wú)法得出滿意結(jié)果,此時(shí),一個(gè)很好的試驗(yàn)方法是用徠卡熒光顯微鏡檢查標(biāo)本,如果在徠卡熒光顯微鏡下肉眼可看到熒光,則在徠卡共聚焦系統(tǒng),其熒光信號(hào)應(yīng)很亮。如果在徠卡共聚焦系統(tǒng)看不到圖像,一方面要檢查使用的熒光控針與儀器的激發(fā)波長(zhǎng)是否匹配,另一方面應(yīng)使用己知的測(cè)試樣本全部檢查共聚焦系統(tǒng)各部分。圖像的數(shù)字文件應(yīng)適當(dāng)編號(hào),并為具體的實(shí)驗(yàn)者所。尤其是在進(jìn)行圖像命名時(shí)盡量少用姓氏作為文件名,這樣很容易混亂和重復(fù)。而且每幅圖像應(yīng)詳細(xì)記錄各種采集參數(shù),包括激光功率、增益、背底水平、針孔直徑、zoom值和使用的物鏡。
在使用徠卡共聚焦顯微鏡實(shí)驗(yàn)本身的問(wèn)題常常是由試劑的降解引起的,應(yīng)進(jìn)行一系列的診斷測(cè)試。實(shí)驗(yàn)使用的試劑自己親自新鮮配制??贵w應(yīng)等分為小份后分別儲(chǔ)存。許多試劑可以重復(fù)使用,而且并不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,尤其對(duì)于昂貴的試劑和稀有的試劑更應(yīng)注意節(jié)約和盡量重復(fù)使用。
 
有時(shí)實(shí)驗(yàn)失敗可能是由于抗體降解引起的。陳舊的標(biāo)本可造成背底熒光的增加,從標(biāo)記的第二抗體分離出來(lái)的熒光色素和彌散到組織中的熒光色素,可以引起熒光滲透。在盡可能的情況下,應(yīng)使用新鮮制備的標(biāo)本觀察。有時(shí)改變熒光控針的濃度和分布也對(duì)獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果大有幫助。如熒光黃滲透到羅丹明通道,可將熒光團(tuán)調(diào)使羅丹明位于較強(qiáng)的通道,因?yàn)闊晒恻S的激發(fā)光譜有一個(gè)尾部位于羅丹明的激發(fā)波長(zhǎng)內(nèi)。
 
備注:徠卡共聚焦顯微鏡的故障排除的部分文章由北京中儀光科科技發(fā)展有限公司編輯整理上傳。

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