ELISA試劑盒但應(yīng)避免反復(fù)凍融
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人乙酰肝素酶(HPA)水平。用純化的人乙酰肝素酶(HPA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乙酰肝素酶(HPA),再與HRP標記的乙酰肝素酶(HPA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰肝素酶(HPA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人乙酰肝素酶(HPA)濃度。
ELISA試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準確度。ELISA試劑盒比如水中總無機氯含量測定, ELISA試劑盒樣品水中含有無機氯 20 mg/L, 取 100mL 被測水樣品, 加入 0.1mL 濃度為 10mg/mL 的含無機氯標準樣品, 測定時忽略體積變化, 如果測定出樣品中無機氯為 2.98mg/L, ELISA試劑盒則認為回收率為98%。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,
雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
雞B因子(BF)ELISA試劑盒
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒
雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒
雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒
雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒
雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
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雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒
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鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
鴨白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒
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鴨環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒
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鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒
綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
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綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
綿羊補體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒
綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
猴白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
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猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒
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