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幾個相差顯微鏡使用注意事項和技巧?

來源:北京瑞科中儀科技有限公司   2014年11月07日 10:46  

相差顯微鏡的使用
  1)安裝相差裝置:將普通顯微鏡的聚光鏡卸下,將帶環(huán)狀光欄的聚光鏡裝到相匹配的顯微鏡上;將顯微鏡的普通物鏡卸下,換上帶位相板的物鏡;將目鏡換成相差顯微鏡的調焦目鏡;在光源進光處放置的綠色濾光片(有時可以不用)。
  2) 對光和聚焦:通過調焦目鏡和粗細調節(jié)螺旋的調節(jié),直至視野中可清晰地看到有一個白圈和一個黑圈。黑圈是固定的,白圈則可通過聚光鏡裝置上的調節(jié)螺旋加以移動,使黑圈與白圈*重合。取下調焦目鏡,換上顯微鏡原來的目鏡,即可進行檢查。
相差顯微鏡使用中的問題分析
  1、樣品厚度的影響 當進行相差觀察時,樣品的厚度應該為5μm或者更薄,當采用較厚的樣品時,樣品的上層是很清楚的,深層則會模糊不清并且會產生相位移干擾及光的散射干擾。
  2、蓋玻片和載玻片的影響 樣品一定要蓋上蓋上蓋玻片,否則環(huán)狀光闌的亮環(huán)和相板的暗環(huán)很難重合。相差觀察對載玻片和蓋玻片的玻璃質量也有較高的要求,當有劃痕,厚薄不均或凹凸不平時會產生亮環(huán)歪斜及相位干擾。另外玻片過厚或過薄時會使環(huán)狀光闌亮環(huán)變大或變小。
  3、暈輪和漸暗效應 在相差顯微鏡成象過程中,某一結構由于相位的延遲而變暗時,并不是光的損失,而是光在象平面上重新分配的結果。因此在黑暗區(qū)域明顯消失的光會在較暗物體的周圍出現一個明亮的暈輪。這是相差顯微鏡的缺點,它妨礙了精細結構的觀察,當環(huán)狀光闌很窄時暈輪現象更為嚴重。相差顯微鏡的另一個現象是漸暗效應,指相差觀察相位延遲相同的較大區(qū)域時,該區(qū)域邊緣會出現反差下降。
  4、相位倒轉 當n’n時得到象的明暗反差正好相反,稱為相位倒轉。當相位差δ=0時是無法識別的,隨著δ的增大反差變大,當δ繼續(xù)增大到某一值后會出現相位倒轉。用90%高吸光值(高反差)物鏡時,這個轉變值約為0.55λ,用70%標準吸光值的物鏡時約為0.33λ。較高吸光值的物鏡應該用于分辨較小的光程差。
調節(jié)相差顯微鏡的對中像是十分重要的步驟,關系到使用相差顯微鏡的zui終效果,如果在使用相差顯微鏡過程中遇到任何問題,均可以致電瑞科中儀科技有限公司進行咨詢。

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