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培養(yǎng)基培養(yǎng)方法

來源:上海博耀生物科技有限公司   2014年11月27日 19:00  

       培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制養(yǎng)料,一般含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等,有的還含有抗菌素、色素、激素和血清。培養(yǎng)基由于配制的原料不同、使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同;液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。

培養(yǎng)基培養(yǎng)方法:

1.配料

配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調成糊狀

加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊

加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調PH

用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養(yǎng)基調節(jié)到所要求的值。

4.過濾

濾紙或棉花進行過濾。

5.分裝

一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養(yǎng),則100 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,zui多不能超過150 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15~20 ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養(yǎng)基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

固體斜面培養(yǎng)基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)

基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。

9.貯存

培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。  

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