上海雙贏生物實驗室細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:
1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。
2.進入凈化室前先關閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。
3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。
4.風淋2分鐘。
5.0.1%過氧乙酸水泡手,擦干。
6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。
7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。
8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。
9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。
10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。
11.操作完畢后恢復工作臺面。
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