按正常人和不同種類癌癥患者進(jìn)行分類 , 用激光拉曼光譜分別對(duì)正常人、鼻咽癌患者、肝癌患者和慢性白血病患者四類受試者的血清在 0 ~ 2 000 cm- 1 范圍內(nèi)進(jìn)行測(cè)試。結(jié)果表明, 同類患者中不同受試者血清的激光拉曼光譜特征峰值大小雖然不同 , 但光譜圖特征基本一致 ; 不同種類癌癥患者血清的激光拉曼光譜圖存在較大差異 ; 在各類癌癥患者血清的激光拉曼光譜圖特征峰附近 , 正常人血清均沒(méi)有拉曼光譜特征峰。
構(gòu)成生物基本的單元為核酸、蛋白質(zhì)、酶和生物膜。生物機(jī)體的特殊內(nèi)能、疾病的產(chǎn)生、藥物的療效與這些分子的組成、構(gòu)象和分子間的相互作用都有著十分密切的關(guān)系。對(duì)生物材料中這些大分子的有關(guān)性質(zhì)進(jìn)行研究具有重要的臨床意義。
X 光衍射和紅外光譜是研究大分子性質(zhì)的常用方法。但X光衍射只能研究晶體 , 紅外光譜幾乎無(wú)法對(duì)水溶液中的生物分子進(jìn)行研究。激光拉曼光譜信息量大 , 能描述晶體或溶液中生物大分子拉曼譜線的位置、強(qiáng)度及譜線寬度等特征。由于水的激光拉曼光譜很弱 , 譜圖也很簡(jiǎn)單 , 因此可以在接近自然條件和活性狀態(tài)下用激光拉曼光譜分析、研究生物大分子的結(jié)構(gòu)及其性質(zhì)。激光拉曼光譜用于對(duì)蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的研究、 DNA 和致癌分子之間的作用、動(dòng)脈粥樣硬化損傷中的鈣化沉積和紅細(xì)胞膜的研究等已均有文獻(xiàn)報(bào)道。將不同組織的激光拉曼光譜分析用于臨床上對(duì)疾病的診斷也有資料報(bào)道。但尚未見用血清為樣本 , 以激光拉曼光譜為檢測(cè)手段 , 對(duì)癌癥進(jìn)行早期準(zhǔn)確診斷的研究報(bào)道。本文在選定的實(shí)驗(yàn)條件下 , 對(duì)正常人和多種癌癥病人的血清進(jìn)行了激光拉曼光譜研究。結(jié)果表明 , 同種類癌癥患者血清的激光拉曼光譜基本相似 , 不同種類特征明顯不同 , 且與正常人血清的激光拉曼光譜均有顯著差異。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 樣品采集
正常人血清 — — — 取自臨床非腫瘤病人 , 不同癌癥患者血清 — — — 取自臨床已確診的腫瘤病人。采取受試者靜脈血 2mL , 離心 , 取血清冷藏保存。
2 結(jié)果與討論
2.1 同類血清樣本的激光拉曼光譜
按正常人和不同種類的癌癥患者進(jìn)行分類 , 分別對(duì)正常人、鼻咽癌患者、肝癌患者和慢性白血病患者的血清進(jìn)行激光拉曼光譜測(cè)定 , 每類病種各測(cè)定 10 個(gè)樣品。結(jié)果表明 ,同類血清樣本激光拉曼光譜重現(xiàn)性好 , 拉曼散射光譜特征基本相似。同類樣品中不同患者血清的拉曼散射光譜特征峰值大小雖然不同 , 但拉曼散射峰頻移沒(méi)有改變。
2.2 不同類血清樣品的激光拉曼光譜
如圖 1 所示 , 不同種類血清樣品的激光拉曼光譜分布存在一定的差異。其中圖 1a 是正常人血清測(cè)得的拉曼光譜 ,它沒(méi)有拉曼散射峰 ; 圖 1b 是鼻咽癌患者血清的拉曼光譜 ,它在 875 cm - 1 處出現(xiàn)了拉曼散射峰 ; 圖 1c 是肝癌患者血清的拉曼光譜 , 它在 1 000 cm - 1 處出現(xiàn)了拉曼散射峰 ; 圖 1d是慢性白血病患者血清的拉曼光譜 , 它沒(méi)有拉曼散射特征峰 , 但有異于正常人血清的拉曼光譜。
2.3 正常人血清和比較
如圖 1 所示 , 在波數(shù)為 0 ~ 2 000 cm - 1 范圍內(nèi) , 正常人血清沒(méi)有拉曼散射峰。在各種散射峰附近 , 正常人血清均不出現(xiàn)拉曼散射特征峰。
相對(duì)正常人而言 , 在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中 , 往往有某些特征性抗原、分泌物等方面的異常現(xiàn)象 , 癌癥患者的組織、體液等生物材料中的細(xì)胞及大分子物質(zhì)均會(huì)發(fā)生某些性狀的改變。采用拉曼散射光譜檢測(cè)儀對(duì)被檢血清進(jìn)行掃描 , 能夠反映出不同組成的檢測(cè)物呈現(xiàn)不同特征的散射光譜。癌癥種類不同 , 患者機(jī)體內(nèi)有關(guān)物質(zhì)的改變狀況也不會(huì)相同 , 這就必然導(dǎo)致不同的差異。拉曼光譜的這些“指紋”性對(duì)于癌癥病人的早期診斷及治療具有重要的臨床意義。
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