使用基因工程的方法來表達(dá)蛋白質(zhì)，必須經(jīng)過純化才能實現(xiàn)zui終目的。不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)純化條件有所不同，亦很難摸索。所以將目的蛋白和一個親和純化的標(biāo)簽蛋白進行融合表達(dá)-通過親和純化Tag蛋白來純化目的蛋白，就成為常用的間接手段。 而His-Tag這個只有6個組氨酸大小的標(biāo)簽蛋白在pH值8.0時不帶電，幾乎沒有免疫原性。經(jīng)過對很多種蛋白的融合驗證試驗，無論對蛋白的分泌、折疊結(jié)構(gòu)、甚至功能都沒有影響，即可放在N端也可放在C端，而更重要的是使用6HIS抗體裝配的親和層析純化柱，通過免疫親和層析純化的方法-將帶有6個組氨酸標(biāo)簽的目標(biāo)蛋白純化出來，不但目標(biāo)蛋白純度高，而且簡單、易行，成本低。所以對融合蛋白純化很方便、實用。因此，已得到國內(nèi)外人員的廣泛應(yīng)用。 His-Tag的特點： 1） 6xHis與不同的Sepharose純化填料結(jié)合(捆綁)，可不受構(gòu)象的影響，在天然或變形的條件下可進行進一步純化。 2） 可在溫和的洗脫液環(huán)境中，其結(jié)合、洗滌及洗脫步驟不會對蛋白結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響。 3） 6xHis標(biāo)簽比普通（Tag）要小得多，經(jīng)純化后的蛋白可直接進行下游操作?？捎糜谌魏伪磉_(dá)系統(tǒng)（包括：細(xì)菌，桿狀病毒和哺乳動物） 4） 6xHis標(biāo)簽在生li溶液pH下不帶電荷，其標(biāo)簽不會干涉重組蛋白的結(jié)構(gòu)和功能， 6xHis不會影響蛋白分泌 5） 6xHis標(biāo)簽免疫原性差，重組蛋白可以不必除去標(biāo)簽而直接作為抗原進行免疫