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上海寶葉生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年
蛋白轉(zhuǎn)染技術(shù)簡(jiǎn)述2024/11/15
蛋白轉(zhuǎn)染是一種將外源蛋白導(dǎo)入細(xì)胞的技術(shù),廣泛應(yīng)用于基因功能研究、藥物開(kāi)發(fā)和基因治療等領(lǐng)域。為了確保蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染的效率和安全性。一、質(zhì)粒DNA的提取與純化1.避免內(nèi)毒素污染:在提取過(guò)程中,要特別注意去除內(nèi)毒素,因?yàn)閮?nèi)毒素會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)染效率??梢允褂脽o(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒提取試劑盒。2.定期檢測(cè)質(zhì)粒質(zhì)量:通過(guò)凝膠電泳或光譜光度計(jì)定期檢測(cè)質(zhì)粒的純度和濃度,確保其滿(mǎn)足轉(zhuǎn)染要求。二、細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)化1.選擇合適的細(xì)胞系:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的細(xì)胞系,常用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,而Hela細(xì)胞則適合穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。2.控制細(xì)胞生
?Vero細(xì)胞的起源和主要特征2024/04/09
深入研究像Vero這樣的細(xì)胞系會(huì)引發(fā)幾個(gè)問(wèn)題:Vero細(xì)胞到底是什么?Vero細(xì)胞系是如何建立的?“Vero”這個(gè)名字背后有什么故事?本部分旨在闡明Vero細(xì)胞的起源和主要屬性。Vero細(xì)胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲綠猴的腎上皮細(xì)胞。這個(gè)品系是由日本千葉大學(xué)的Y.Kawakita和Yasumura培育的?!癡ero”一詞源自世界語(yǔ)中的“Verdareno”,翻譯成“綠色腎臟”,盡管“Vero”也與“真理”的概念產(chǎn)生了共鳴。Vero細(xì)胞通常形成單層,但可以適應(yīng)懸浮培養(yǎng),顯示出上皮樣結(jié)
什么是瓊脂糖珠?2024/04/08
什么是瓊脂糖珠?瓊脂糖珠是具有不同粒徑和濃度的水凝膠。瓊脂糖由瓊脂二糖的重復(fù)單元組成。瓊脂糖珠通常是交聯(lián)和多孔的,因此蛋白質(zhì)可以流過(guò)珠子。這些珠子可用于尺寸排阻或親和層析。對(duì)于親和層析,配體(如NTA或IDA)共價(jià)連接到瓊脂糖珠聚合物上,因此標(biāo)記的蛋白質(zhì)可以與其他蛋白質(zhì)分離。幾十年來(lái),瓊脂糖基質(zhì)一直用于蛋白質(zhì)純化,并且各種基于瓊脂糖的基質(zhì)是可商購(gòu)的。不同基質(zhì)之間的物理性質(zhì)差異很大。德國(guó)CubeBiotech是一家專(zhuān)注于蛋白相關(guān)產(chǎn)品的生產(chǎn)商和服務(wù)商,尤其擅長(zhǎng)于蛋白純化及膜蛋白純化。CubeBiot
使用 dsGreen 對(duì)凝膠進(jìn)行 DNA 染色2024/03/13
dsGreen是一種特異性結(jié)合雙鏈DNA的熒光染料。染色方案有三種變體:凝膠浸泡、凝膠預(yù)染色和樣品預(yù)染色。凝膠浸泡瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠的經(jīng)典方法。在瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中運(yùn)行樣品。在燒杯中,將10µL10,000×dsGreenDMSO溶液添加至100mL1×TE、TBE或TAE緩沖液(對(duì)于小型凝膠),或?qū)?0µL10,000×dsGreenDMSO溶液添加至500mL1×TE、TBE或TAE緩沖液(用于中型凝膠)。用抹刀、棒或磁力攪拌器充分混合。將稀釋的dsGreen溶液倒入適當(dāng)?shù)耐斜P(pán)或平
電泳導(dǎo)條技術(shù)簡(jiǎn)述2024/03/05
在某些情況下,蛋白質(zhì)染色的影響可能會(huì)干擾后續(xù)分析。例如,當(dāng)需要酶活性時(shí),考馬斯染色;或者當(dāng)氨基酸的共價(jià)修飾會(huì)產(chǎn)生虛假結(jié)果時(shí),在氨基酸分析之前進(jìn)行銀染色。在這些情況下,通常使用“導(dǎo)向帶”。引導(dǎo)條是與待分析泳道平行的泳道,包含尺寸標(biāo)記或重復(fù)樣品。凝膠運(yùn)行后,將導(dǎo)帶剪下并染色,然后與凝膠重新對(duì)齊并用作模板來(lái)引導(dǎo)條帶切除。該技術(shù)很簡(jiǎn)單。常見(jiàn)的錯(cuò)誤是染色后未能用電泳緩沖液重新平衡凝膠。由于許多污漬會(huì)導(dǎo)致凝膠收縮或膨脹,重新平衡對(duì)于準(zhǔn)確和一致的重新調(diào)整是必要的。在引導(dǎo)帶技術(shù)中,平行泳道被切除并染色以引導(dǎo)帶切
如何進(jìn)行DNA 大小選擇?2024/02/22
圖1.DNA大小選擇工作流程。混合:將MagVigen™納米顆粒與DNA/RNA樣品混合。結(jié)合:與樣品混合時(shí),MagVigen™納米顆粒會(huì)結(jié)合所需的DNA/RNA大小片段。這種相互作用依賴(lài)于DNA/RNA分子和納米粒子表面之間的多種因素,例如電荷-電荷相互作用、親水/疏水相互作用、范德華力和其他分子間力。NVIGEN對(duì)磁珠的表面化學(xué)和緩沖環(huán)境進(jìn)行了設(shè)計(jì),為所需的DNA大小片段選擇提供理想的相互作用。清洗:珠子響應(yīng)磁力(通過(guò)使用磁鐵,例如磁力分離架),使結(jié)合的材料能夠快速有效地與樣品的其余部分分離
什么是膜蛋白?2024/02/21
膜蛋白質(zhì)組和分泌蛋白組被認(rèn)為是很大和很重要的蛋白質(zhì)類(lèi)別之一。膜蛋白被定義為與細(xì)胞膜或細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器相關(guān)或附著的蛋白質(zhì)。它們分為外周蛋白和整合蛋白。外周膜蛋白暫時(shí)與脂質(zhì)雙層相關(guān),但不全跨越膜。與脂質(zhì)雙層的附著是通過(guò)外圍區(qū)域的穿孔或通過(guò)與整合膜蛋白偶聯(lián)來(lái)實(shí)現(xiàn)的(參見(jiàn)圖3,B和C)。這些整合蛋白被嵌入,跨越整個(gè)脂質(zhì)雙層,并包含駐留在膜內(nèi)的疏水性α螺旋或β桶結(jié)構(gòu)。根據(jù)它們的細(xì)胞功能,它們可以進(jìn)一步細(xì)分為受體或通道等組。與親水性的胞外和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域一起,大多數(shù)膜蛋白表現(xiàn)出兩親性特征。兩親性特征還產(chǎn)生一種特征,
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì) 寶葉生物2024/02/19
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)本公司研制的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳低分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì),使用方便,效果尤佳。其分子量范圍是14400~97400道爾頓。成分:成分分子量(道爾頓)含量(μg/支)兔磷酸化酶B/RabitphosphorglaseB9740040牛血清白蛋白/BovineserumAlbumin6620040兔肌動(dòng)蛋白/Rabbitactin4300040牛碳酸酐/Bovinecarbonicanhydrase3100040胰蛋白酶抑制劑/Trypsininhibit
纖維素透析袋-上海寶葉生物即用型透析袋2024/02/19
YY11736-2纖維素透析袋MWCO:1000USA英文名稱(chēng):CelluloseesterDialysismembranes截留分子量:1000規(guī)格:4種規(guī)格,分別為:寬10mm,容積0.32ml/cm;寬16mm,容積0.81ml/cm;寬24mm,容積1.8ml/cm;寬31mm,容積3.1ml/cm產(chǎn)品特點(diǎn):Anultrahighpurityandpreciseseparationdialysismembrance.1.Hydrophilicanduniformmolecularporo
關(guān)于低聚木糖2019/07/09
一、簡(jiǎn)介低聚木糖,又稱(chēng)木寡糖,是由2~9個(gè)木糖單元,以β-1,4糖苷鍵連接而成的低聚糖混合物。S11137-25g低聚木糖BR,95%25g80.00現(xiàn)貨S11137-100g低聚木糖BR,95%100g180.00現(xiàn)貨S11137-500g低聚木糖BR,95%500g700.00現(xiàn)貨二、功效和應(yīng)用低聚木糖不僅能量低,而且具有許多有益功效:1.促進(jìn)有益菌雙歧桿菌增殖,同時(shí)產(chǎn)生多種有機(jī)酸,降低腸道pH值,抑制有害菌生長(zhǎng);2.低聚木糖的攝入,可減少有毒代謝產(chǎn)物形成,從而減少了肝臟分解毒素的負(fù)擔(dān);3.
福林酚,福林酚介紹,實(shí)驗(yàn)福林酚2018/07/23
英文名稱(chēng):Foline-phenol;Folin&Ciocalteu’sphenolreagent其他名稱(chēng):福淋酚;酚試劑的別:BR濃度:1摩爾/升原理:磷鉬酸和磷鎢酸在堿性條件下易被酚類(lèi)化合物還原而呈藍(lán)色反應(yīng),蛋白質(zhì)中含有帶酚基的酪氨酸故有此反應(yīng)。Folin-酚法靈敏度是雙縮脲法的100倍性狀(以下信息僅供參考):黃色或黃綠色液體,接觸空氣很容易氧化成綠色用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)適用于進(jìn)行總蛋白定保存:RT
綠原酸,綠原酸,介紹2018/05/30
綠原酸是金銀花的主要抗菌、抗病毒有效藥理成分之一。綠原酸具有較廣泛的抗菌作用,但在體內(nèi)能被蛋白質(zhì)滅活。與咖啡酸相似,口服或腹腔注射時(shí),可提高大鼠的中樞興奮性??稍黾哟笫蠹靶∈蟮男∧c蠕動(dòng)和大鼠子宮的張力。有利膽作用,能增進(jìn)大鼠的膽汁分泌。對(duì)人有致敏作用,吸入含有本品的植物塵埃后,可發(fā)生氣喘、皮炎等。綠原酸簡(jiǎn)介英文名:Chlorogenicacid化學(xué)結(jié)構(gòu)式摘自Microherb別名:氯原酸,咖啡鞣酸,3-咖啡??酑yclohexanecarboxylicacid,(1S,3R,4R,5R)-3-
蘆丁,蘆丁 介紹2018/05/25
蘆丁(拼音:lúdīng,英語(yǔ):Rutin,化學(xué)名:C.I.75730),又稱(chēng)為蕓香甙,維生素P,紫槲皮甙,路丁,路丁粉,路通,絡(luò)通,紫皮甙。蘆丁Rutin異名:蕓香甙,維生素P,紫槲皮甙,路丁,路丁粉,路通,絡(luò)通,紫皮甙。Rutoside,Violaquereitrin化學(xué)名:C.I.75730;Rutin[JAN];(+)-RutinHydrate;Quercetin-3-rutinoside~VitaminP;2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-
3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺/TMB游離酸/TMB2018/05/21
英文名稱(chēng):TMB;3,3,5,5-Tetramethylbenzidine;Tetramethylbenzidine其他名稱(chēng):TMB游離酸;3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯-4,4’-二胺;3,3',5,5'-四甲基對(duì)二氨基聯(lián)苯CAS號(hào):54827-17-7C16H20N2=240.35的別:BR含量:≥99.0%干燥失重:≤0.50%熔點(diǎn):168~171℃性狀(以下信息僅供參考):白色或米黃色結(jié)晶粉末用途:本品僅供科研,不得用于其它用途保存:2~8℃,避光,遠(yuǎn)離金屬
試劑盒包括哪些規(guī)格?2018/01/20
試劑盒規(guī)格以T/S來(lái)表示,其中T表示該試劑盒能夠測(cè)定的次數(shù),S表示該試劑盒能夠測(cè)定的樣品數(shù)。例如50T/24S,表示該試劑盒可以測(cè)定50次,但是能夠測(cè)定的樣品數(shù)為24個(gè)樣品(不包括重復(fù))。考慮到用戶(hù)使用方便和降低價(jià)格,試劑盒常量法的規(guī)格以50T為主,而微量法以100T為主。
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒的原理、使用方法及注意事項(xiàng)2018/01/20
細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒的原理、使用方法及注意事項(xiàng)細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡是為維持環(huán)境穩(wěn)定,為更好的適應(yīng)勝春環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過(guò)程,它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等作用,是一種字體損傷的現(xiàn)象。zui常用的目前就是細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒原理細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。AnnexinV是一種分子量為35.8KD的Ca2+依賴(lài)性磷脂結(jié)合蛋白,能與細(xì)胞凋亡過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(Phosphati
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的各種疑問(wèn)2018/01/20
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的各種疑問(wèn):1,水質(zhì)原因:點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證,用娃哈哈礦泉水代替2,實(shí)驗(yàn)操作原因吸取到其它相吹干,準(zhǔn)確的取液吹干離心不*,延長(zhǎng)離心時(shí)間樣本的污染,更換樣本乳化未處理*,溫?。?0℃)處理乳化現(xiàn)象3,儀器試劑原因離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具有機(jī)溶劑的影響,ELISA試劑盒做試劑空白看影響結(jié)果4,衍生化試劑原因(長(zhǎng)時(shí)間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑5,與曲線好壞相關(guān),,保證曲線的正常ELISA試劑盒回收率1.空白管陽(yáng)性高樣本本身就是陽(yáng)性樣本,換陰性樣本做回收率空白管在實(shí)
培養(yǎng)基定義與分類(lèi)2017/07/28
培養(yǎng)基(medium)培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。任何培養(yǎng)基中均需含有微生物所必須的能源、碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水和生長(zhǎng)因素,但不同營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型、不同種類(lèi)的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的要求又有很大差異。目前已使用的各種培養(yǎng)基都是前人經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)踐,比較設(shè)計(jì)的成果。培養(yǎng)基的基本成分能源、碳源:自養(yǎng)微生物以二氧化碳為碳源,光或無(wú)機(jī)物為能源,在無(wú)機(jī)物組成的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。例如化能自養(yǎng)型的氧化硫桿菌培養(yǎng)基中,加進(jìn)粉末狀硫?yàn)槟茉?,以空氣中的CO2為碳源。異養(yǎng)微生物以有機(jī)物為碳源和能源,培養(yǎng)
甲基綠,進(jìn)口分裝甲基綠,甲基綠廠家2016/11/29
英文名稱(chēng):MethylGreenzincchloridesalt其他名稱(chēng):[α-[P-(二甲基氨基)苯基]-α-[4-(二甲基亞氨基)-2,5-環(huán)己二烯-1-亞基]-P-甲苯基]乙基二甲基銨氯溴化物;雙綠SF;堿性藍(lán)20;甲基綠氯化鋅鹽CAS號(hào):7114-03-6C27H35BrClN3·ZnCl2=653.24的別:ARDyeContent:≥85.0%MoistureContent:≤15.0%性狀(以下信息僅供參考):粉末。溶于水用途:本品僅供科研,不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)核
福林酚。福林酚用途,福林酚2016/08/23
基本簡(jiǎn)介福林酚試劑制備:向2000mL的磨口回流瓶中加入100g鎢酸鈉(Na2WO2·2H2O)、25g鉬酸鈉及700mL的去離子水,再加入50mL85%的磷酸及濃鹽酸l00mL,充分混合后,接上回流冷凝管,以小火回流10h,結(jié)束后再加入150g的硫酸鋰(Li2SO4)、50mL去離子水及數(shù)滴液溴,再繼續(xù)沸騰15min,以驅(qū)除過(guò)量的溴,冷卻后濾液呈黃綠色(如仍呈綠色,需再重復(fù)滴加溴水的步驟),加去離子水定容至1000mL,過(guò)濾,濾液置于棕色試劑瓶中,貯于冰箱中可長(zhǎng)期保存?zhèn)溆?。此溶液使用時(shí)可按1:
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