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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第9年
微生物、類菌質(zhì)體和病毒等抗原的純化操作2017/04/27
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書首先應(yīng)分離出純化的株系或毒株,并對(duì)該株系或毒株進(jìn)行生物化學(xué)、血清學(xué)、紫外吸收光譜、電鏡觀察等鑒定,然后將經(jīng)過簽定的純化株系或毒株進(jìn)行生物學(xué)繁殖,在適當(dāng)時(shí)間再將所需株系和毒株提純,得到大量材料,zui后再予以鑒定,并測定其濃度。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書在此要特別注意以下幾點(diǎn):1.材料本身是否穩(wěn)定,如果不太穩(wěn)定就要尋找使它穩(wěn)定的條件;2,材料是否容易從寄主中提純,利率是否高,要盡量尋找利率高的提純方法;3,材料本身免疫原性(即抗原性)是否強(qiáng),經(jīng)提純所得材料免疫原性
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)避免誤差時(shí)注意事項(xiàng)2017/04/25
1.進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒從冷躲環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝進(jìn)密封袋中保留。2.濃洗刷液可能會(huì)有結(jié)晶析出,ELISA試劑盒稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗刷時(shí)不影響成果。3.各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并常常校正其正確性,以避免實(shí)驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)刻*控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,引薦運(yùn)用排槍加樣。4.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒請(qǐng)先將樣本稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測定,核算時(shí)請(qǐng)zui
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒樣品稀釋方法2017/04/20
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒在使用操作時(shí),檢測樣品的因素是實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)之一。根據(jù)我司技術(shù)員的研究與發(fā)現(xiàn),原來ELISA試劑盒的樣品稀釋還有這等講究……我們以血清樣品為例,酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽性。因此,國外檢測血清抗體的試劑盒,均規(guī)定將血清稀釋至適當(dāng)?shù)谋稊?shù),以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定,進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴(yán)
elisa試劑盒前期準(zhǔn)備工作和操作流程2017/04/18
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒前期準(zhǔn)備工作:實(shí)驗(yàn)前樣本和試劑盒室溫平行1小時(shí),如果樣本是凍存樣本,應(yīng)提前拿到2-8攝氏度進(jìn)行解凍(不建議直接室溫解凍)準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)所需耗材,蒸餾水(去離子水)。進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作流程:1,將要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的版孔進(jìn)行設(shè)定好,標(biāo)準(zhǔn)品5個(gè)點(diǎn),每個(gè)點(diǎn)設(shè)定平行,需要用到10個(gè)孔,空白只需1個(gè)孔。剩下孔可以做為樣本孔2,稀釋標(biāo)準(zhǔn),準(zhǔn)備好5個(gè)EP管,然后在每個(gè)EP管中加入150微升標(biāo)準(zhǔn)稀釋液,編上編碼,分別為1,2,3,4,5,在1號(hào)管中加入150標(biāo)準(zhǔn)品,用槍頭反復(fù)吹打1
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒代測主要采用的方法2017/04/13
一、進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒直接法將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。1.優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運(yùn)用二抗可防止交互反響。2.缺陷:實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。二、進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒間接法此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級(jí)抗體沒有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測定抗原量。1.優(yōu)勢:二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保存它
影響elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格檢測結(jié)果分析2017/04/11
影響elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格檢測結(jié)果的三大條件,它們分別是標(biāo)本因素、固相載體、ELISA加樣步驟。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色……一、標(biāo)本因素血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。本文
分析elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書出現(xiàn)異常原因2017/04/06
一、elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書白板異常:顯色步驟結(jié)束后,酶標(biāo)板所有孔均無顏色。陽性對(duì)照不顯色。1.試劑已過效期,或不同試劑盒組分混用(解決方式:檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)未過期以及所有組分均屬對(duì)應(yīng)的試劑盒。不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用)。2.錯(cuò)加、漏加試劑底物、顯色劑A或B(解決方式:嚴(yán)格按說明書的步驟操作,加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現(xiàn)象)。3.洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力(解決方式:確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒試驗(yàn)規(guī)范2017/04/01
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶聯(lián)絡(luò)物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留心不可濺起,不可發(fā)生氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器,按規(guī)矩的量參與板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,避免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)矩的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參與稀釋液,再在其間參與血清標(biāo)本,然后在微型轟動(dòng)器上轟動(dòng)1分鐘以確?;旌?。加酶聯(lián)絡(luò)物使用液和底物使用液時(shí)可用定量多
標(biāo)準(zhǔn)品的溶解和稀釋分析2017/03/30
1.elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書粉末標(biāo)準(zhǔn)品短暫離心,讓因運(yùn)輸沾到管蓋、管壁的標(biāo)準(zhǔn)品沉到管底。2.根據(jù)瓶標(biāo)簽加入一定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震蕩,室溫靜置溶解10-30min,讓粉末*溶解。注意:加水后暫不用移液槍吹吸,避免蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待*溶解后可吹吸或渦旋振蕩混勻。3.elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:(1)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的選擇:若血清、血漿、組織勻漿樣本,用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。若細(xì)胞上清樣本,建議用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。(2)耗材準(zhǔn)備:
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒如何選擇*化的包被條件?2017/03/28
1.進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒包被抗原的選擇包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對(duì)于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標(biāo)板上,再通過特異性反應(yīng)使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上,一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián),偶聯(lián)物吸附于固相載體上。2.包被液的選擇一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩
植物乙烯(ETH)Elisa試劑盒操作注意事項(xiàng)和標(biāo)本要求2017/03/23
植物乙烯(ETH)Elisa試劑盒注意事項(xiàng)1.elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意的事項(xiàng)2017/03/21
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意的事項(xiàng):1.正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求P
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格抗原抗體反應(yīng)分析2017/03/16
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格特異性:抗原抗體的結(jié)合實(shí)質(zhì)上只發(fā)生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)之間。由于兩者在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型上呈互補(bǔ)關(guān)系,所以抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。例如乙肝病毒中的表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗體(HBcAg),隨來源于同一病毒,但僅與其相應(yīng)的抗體結(jié)合,而不與另外兩種抗體反應(yīng)。抗原抗體反應(yīng)的這種特異性使免疫測定能在一非常復(fù)雜的蛋白質(zhì)化合物(例如血清)中測定某一特定的物質(zhì),而不需先分離待檢物。但是這種特異性也不是的。假使兩種化合物有著部分相同
檢測進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒前準(zhǔn)備工作和所需自備物品2017/03/14
檢測進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒前準(zhǔn)備工作:1.請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。2.將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。3.標(biāo)準(zhǔn)品:加入標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,靜置10分鐘,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為5000pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)。建議配制成以
雞丙二醛(MDA)ELISA試劑盒結(jié)果判定常用的方法2017/03/09
1)進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定為陰性。2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒樣品中待測物
ELISA試劑盒作為一種靈敏、迅速、特異性強(qiáng)的辦2017/03/07
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格從免疫原性及不亂性等方面臨5種抗原進(jìn)行對(duì)比,*挑選活化酯法組成的BSA-SM/b作為免疫抗原,經(jīng)過雜交瘤技能取得1株能不亂排泄抗鏈霉素特異性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株5C10。經(jīng)過試驗(yàn)對(duì)比了5種樣品處理辦法,ELISA試劑盒挑選用Careez法處理并4倍稀釋后用于測定。為探究一種可以迅速有用的檢查牛奶中鏈霉素殘留的辦法,本研討選用單克隆抗體技能等技能,合工抗原,制備出抗鏈霉素單克隆抗體,樹立了檢查牛奶中SM殘留的ELISA測定法,組建成鏈霉素迅速檢查elisa酶聯(lián)免疫試
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒保存需要注意哪些2017/03/02
(1)進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長,其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。(3)進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書標(biāo)本的采取和保存2017/02/28
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書可用作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本
ELISA實(shí)驗(yàn)操作各環(huán)節(jié)技巧2017/02/23
1、elisa試劑盒包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別。還有有的包被原可能不是蛋白,對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被,具體方法簡要的列出如下:①親和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。②脂類物質(zhì):可將其在有機(jī)溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,開蓋置冰箱或冷風(fēng)吹干,待酒精揮發(fā)后,讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才
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