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2023
11-28

直播答疑 | 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)要點(diǎn)解析
11月16日，普諾賽直播間為大家介紹了懸浮細(xì)胞的生長特點(diǎn)、培養(yǎng)注意事項，并通過THP-1、NK-92、NCI-H209三個細(xì)胞案例，深入講解了懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要點(diǎn)。直播回放可移步至B站-“普諾賽生物”進(jìn)行觀看。本期直播答疑，從直播間提問中，篩選出部分有代表性的問題，做了詳細(xì)解答。如有其他問題，也歡迎大家在推文底部留言，我們將在線解答。Q1傳代時，細(xì)胞密度比較低，但是培養(yǎng)基又變黃了，怎么辦？細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞量較少，但培養(yǎng)基變黃較快，可以從以下3個方面進(jìn)行排查：?檢查培養(yǎng)基成分是否正常，如N
2023
11-28

細(xì)胞學(xué)堂 | 培養(yǎng)B16系列細(xì)胞必看知識點(diǎn)
B16系列細(xì)胞屬于小鼠黑色素瘤細(xì)胞系，是源自C57小鼠的一種皮膚癌細(xì)胞，常用于腫瘤生物學(xué)研究。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了B16系列細(xì)胞的培養(yǎng)方法與注意事項，B16細(xì)胞黑色素的形成原因及解決方法，幫助您快速上手開展實(shí)驗(yàn)。01B16系列細(xì)胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)條件RPMI-1640(PM150110)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120)；生長特性貼壁生長，生長迅速，能產(chǎn)生黑色素；傳代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min，推薦傳代比例1:3-1:4；凍存推薦凍存密度
2023
11-20

培養(yǎng)基成分的稱取、分裝及保存！
培養(yǎng)基成分的稱?。号囵B(yǎng)基的各種成分必須**稱取并要注意防止錯亂，*好一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?cè)，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后，即移放于右側(cè)。稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。培養(yǎng)基的分裝：培養(yǎng)基的分裝，應(yīng)按使用的目的和要求，分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時*好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時，
2023
11-14

細(xì)胞學(xué)堂 | 手把手教你培養(yǎng)SV-HUC-1
SV-HUC-1(人輸尿管上皮永生化細(xì)胞)，是由猿猴空泡病毒40轉(zhuǎn)染至1名11歲男孩的泌尿道上皮細(xì)胞，而建立起來的永生化細(xì)胞系。其分化特性與正常細(xì)胞相似，培養(yǎng)簡單，可無限傳代，卻不屬于腫瘤細(xì)胞[1]?；A(chǔ)信息?生長培養(yǎng)基：Ham'sF-12K＋10%FBS＋1%P/S?生長特性：貼壁，上皮細(xì)胞樣?推薦傳代比例：1:2-1:4?推薦換液頻率：2~3次/周?培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃?凍存條件：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSOSV-HUC-1細(xì)胞正常生長細(xì)胞傳
2023
11-14

直播答疑 | 原代細(xì)胞培養(yǎng)常見問題及解決方案
原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的首-次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是細(xì)胞系建立的第一步。在9月22日開播的“原代細(xì)胞常見問題解決方案”課程中，有很多老師就原代細(xì)胞培養(yǎng)問題提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細(xì)解答。臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞需要包被嗎？選用什么包被比較好？臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞建議包被，建議選用0.1%明膠包被，包被的細(xì)胞形態(tài)會比不包被的好看。角質(zhì)細(xì)胞需要包被嗎？角質(zhì)細(xì)胞生長類似上皮細(xì)胞，營養(yǎng)環(huán)境要求高，建議使用膠原蛋白包被。細(xì)胞原皿狀態(tài)很好，傳代后細(xì)胞邊界不清楚是什么原因？感覺虛化的很快。
2023
11-03

人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞的研究與治療
人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞是一種特殊的白血病細(xì)胞，它起源于單核細(xì)胞。這種疾病在人體血液中形成腫瘤，對患者的生命構(gòu)成嚴(yán)重威脅。盡管科學(xué)家們已經(jīng)進(jìn)行了大量的研究，但人單核細(xì)胞白血病的發(fā)病機(jī)制仍未全明確，因此也缺乏有效的針對性治療方法。下面將探討細(xì)胞的特性、研究進(jìn)展以及現(xiàn)有的治療方法。白血病細(xì)胞具有其生物學(xué)特性。首先，它具有粘附性，可以粘附到骨髓和其他組織的表面。其次，它具有遷移性，可以在骨髓和其他組織中自由移動。此外，細(xì)胞還可以逃避機(jī)體的免疫監(jiān)控，使得疾病難以控制。近年來，科學(xué)家們對人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞的
2023
10-23

細(xì)胞學(xué)堂 | 微血管內(nèi)皮細(xì)胞知識盤點(diǎn)
微血管內(nèi)皮細(xì)胞（microvascularendothelialcells,MVECs）構(gòu)成了血液與組織液之間的物理屏障，而且在機(jī)體的凝血與抗凝血、致炎與抗炎及免疫應(yīng)答等方面起著十分重要的作用，其體外培養(yǎng)模型廣泛應(yīng)用于相關(guān)研究。但由于不同組織器官的微血管內(nèi)皮細(xì)胞之間存在較大的異質(zhì)性，同時微血管內(nèi)皮細(xì)胞因解剖部位不同，在形態(tài)學(xué)、表型和功能上等方面也存在明顯異質(zhì)性，不同來源的血管內(nèi)皮細(xì)胞之間是不可相互替代的，主要包括腸、肺、心臟、腦、脈絡(luò)膜、視網(wǎng)膜、真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞等。本期細(xì)胞學(xué)堂為大家整理了微血
2023
10-08

293T細(xì)胞：人胚腎細(xì)胞的理想模型
293T（人胚腎細(xì)胞）已成為生物醫(yī)學(xué)研究中的重要工具。由于其易于培養(yǎng)，具有高增殖能力，以及能穩(wěn)定表達(dá)外源基因的特點(diǎn)，293T細(xì)胞系已成為基因克隆和基因功能研究的理想模型之一。人胚腎細(xì)胞（或稱293細(xì)胞）是由格倫·R·克拉克在1970年代初從一名4個月大的胎兒的腎臟中提取并建立的一種細(xì)胞系。這種細(xì)胞能很好的適應(yīng)于各種實(shí)驗(yàn)條件，在科學(xué)研究上有著廣泛的應(yīng)用。293T細(xì)胞的特點(diǎn)之一是它們能在無特定動物血清的培養(yǎng)基中生長。這種細(xì)胞培養(yǎng)要求低，容易在生物反應(yīng)器中大規(guī)模培養(yǎng)。它們也容易轉(zhuǎn)染，能夠高效地表達(dá)外源
2023
09-28

細(xì)胞學(xué)堂 | 如何判斷細(xì)胞狀態(tài)
培養(yǎng)細(xì)胞時，由于培養(yǎng)的環(huán)境各不相同，同時細(xì)胞各階段的形態(tài)也存在一定差異，沒有一個確定的參照物去比對，很多老師同學(xué)也無法確定自己所養(yǎng)細(xì)胞的狀態(tài)是否正常。那么如何判斷細(xì)胞狀態(tài)是正常還是異常呢？本期細(xì)胞學(xué)堂將詳介紹幾種常用的判斷方法，學(xué)會這幾招，輕松辨別細(xì)胞狀態(tài)！01如何判斷細(xì)胞活率臺盼藍(lán)染色法臺盼藍(lán)是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性，可以檢測出細(xì)胞是否存活。正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常
2023
09-20

大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)需要注意哪些問題
H9c2(2-1)大鼠心肌細(xì)胞是一株由Kimes·B和Brandt·B從BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆得到的細(xì)胞株；H9c2(2-1)細(xì)胞表現(xiàn)出許多骨骼肌的特性。H9c2(2-1)細(xì)胞中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%，H9c2(2-1)細(xì)胞融合發(fā)生得很快。培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞時，需要注意以下幾點(diǎn)：1、鼠齡選擇：新生1～3d齡大鼠的心肌細(xì)胞在出生后3d內(nèi)具有部分的增殖能力，而成年大鼠的心肌細(xì)胞則為終末分化細(xì)胞，不再具有分裂增殖能
2023
09-01

293T（人胚腎細(xì)胞）的特性與應(yīng)用
293T細(xì)胞，也被稱為293T（人胚腎細(xì)胞），是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的細(xì)胞系。這種細(xì)胞系源于人類胎兒的腎臟細(xì)胞，并通過遺傳工程改造獲得了一種能夠表達(dá)逆轉(zhuǎn)錄酶的突變，因此得名293T。項目將探討293T細(xì)胞的特性、應(yīng)用以及在生物醫(yī)學(xué)研究中的重要地位。293T細(xì)胞具有許多理想的細(xì)胞系特征，使其在生物醫(yī)學(xué)研究中備受青睞。首先，293T細(xì)胞生長迅速，能夠在適宜的培養(yǎng)條件下迅速增殖。其次，293T細(xì)胞具有易于轉(zhuǎn)染的特性，這使得研究人員能夠方便地將外源性基因?qū)爰?xì)胞，進(jìn)行基因功能研究和基因治療研究。此
2023
08-24

4T1 （小鼠乳腺癌細(xì)胞）的研究及其在癌癥治療中的應(yīng)用
乳腺癌是全球女性最常見的癌癥之一，對公眾健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。在多種乳腺癌亞型中，4T1（小鼠乳腺癌細(xì)胞）的生物學(xué)特性及腫瘤轉(zhuǎn)移潛能引起了科研人員的特別關(guān)注。4T1細(xì)胞來源于410-6乳腺癌細(xì)胞，其能在BALB/c小鼠中產(chǎn)生自發(fā)性的肺轉(zhuǎn)移，這一特性使其在研究乳腺癌轉(zhuǎn)移機(jī)制及探索新型治療策略方面成為一個有價值的模型。4T1（小鼠乳腺癌細(xì)胞）具有高度的侵襲性和轉(zhuǎn)移潛能，其通過激活Src通路、誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）以及引發(fā)免疫逃避等機(jī)制促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。此外，4T1細(xì)胞還能產(chǎn)生大量的炎性細(xì)胞因子，如IL
2023
08-23

細(xì)胞學(xué)堂|肺泡上皮細(xì)胞知識盤點(diǎn)
肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管，它們的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡。肺泡或肺的氣體交換表面由I型肺泡上皮(ATⅠ,AT1)、II型肺泡上皮(ATⅡ,AT2)和微血管內(nèi)皮細(xì)胞組成。其中，ATⅠ細(xì)胞又稱小肺泡細(xì)胞，其主要作用是參與構(gòu)成氣血屏障、進(jìn)行氣體交換；ATⅡ細(xì)胞又稱大肺泡細(xì)胞，是肺泡上皮中的祖細(xì)胞，具有很強(qiáng)的增殖和分化潛能，可分化成ATⅠ，在維持肺臟穩(wěn)態(tài)以及肺損傷修復(fù)過程中起著至關(guān)重要的作用。圖1肺泡模式圖圖2肺泡細(xì)胞的外觀：上皮I型細(xì)胞(I)、上皮II型細(xì)胞(
2023
08-18

小鼠腎小管上皮細(xì)胞使用時需要注意哪些
BV2(小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞)小鼠腎小管上皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素-D3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。小鼠腎小管上皮細(xì)胞的注意事項：1、收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等
2023
08-16

文獻(xiàn)解讀|開發(fā)共價核酸適體用于新-冠病毒的檢測和抑制
核酸適體是一段能特異性識別靶標(biāo)分子的單鏈DNA或RNA，已被廣泛用于各種生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用。然而，由于適體的構(gòu)象動態(tài)易變，抗環(huán)境干擾能力弱，從而影響與靶標(biāo)的結(jié)合親和力以及核酸適體-靶標(biāo)復(fù)合物的穩(wěn)定性，因此與商業(yè)抗體相比，核酸適體在檢測和治療方面的性能通常一般。湖南大學(xué)化學(xué)生物傳感與計量學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的王丹博士為我們闡述了如何合理地設(shè)計親電標(biāo)簽功能化的核酸適體通過點(diǎn)擊化學(xué)的共價偶聯(lián)技術(shù)實(shí)現(xiàn)新-冠病毒的靈敏檢測和侵染阻斷，進(jìn)一步推動了適體在診斷、分子成像、疾病治療和其他生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。該研究于202
2023
08-15

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞提取方法
作為常見的干細(xì)胞類型，人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和臨床治療。細(xì)胞具有分化潛能，可以分化為各種類型的細(xì)胞，如成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞等。它們在細(xì)胞替代治療、組織工程和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用前景。下面將為您詳細(xì)介紹干細(xì)胞的提取方法。首先，我們需要對提取的細(xì)胞進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。這包括細(xì)胞活性檢測、純度檢測和細(xì)胞計數(shù)。細(xì)胞活性檢測通常使用MTT實(shí)驗(yàn)，將細(xì)胞與MTT試劑混合，觀察細(xì)胞的生長情況。純度檢測可以通過細(xì)胞計數(shù)和血球計數(shù)板計數(shù)來實(shí)現(xiàn)。細(xì)胞計數(shù)時，將細(xì)胞懸液加入血球計數(shù)板，使用
2023
08-11

直播答疑 | 三大難養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)解析
6月29日，普諾賽就RAW264.7、SF9、NK-92這三個細(xì)胞進(jìn)行了一場直播分享，分別詳細(xì)講解了三株細(xì)胞的培養(yǎng)方法及需要注意的問題。直播回放可以點(diǎn)擊普諾賽公眾號菜單欄【資料中心】-【往期直播回放】查看學(xué)習(xí)。本期直播答疑，從直播間的提問中，篩選出其中有代表性的問題，逐一進(jìn)行解答。01問RAW264.7細(xì)胞如何傳代？用細(xì)胞刮刀對細(xì)胞有影響嗎？一定要吹下來嗎？吹不下來的是狀態(tài)不好的細(xì)胞嗎？RAW264.7細(xì)胞傳代方法：①培養(yǎng)基中的漂浮的細(xì)胞離心收集②輕拍培養(yǎng)瓶，將貼壁松散的細(xì)胞拍起來③用1ml的槍
2023
08-01

你了解大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基嗎？
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基是一種重要的細(xì)胞培養(yǎng)基，具有低pH值、營養(yǎng)豐富、易于消化等特點(diǎn)。通過合理選擇和優(yōu)化培養(yǎng)基成分，可以進(jìn)一步促進(jìn)干細(xì)胞的增殖和分化，為相關(guān)領(lǐng)域的研究和應(yīng)用提供有力支持。1、兼容性：培養(yǎng)基應(yīng)與大鼠骨髓細(xì)胞具有良好的兼容性，以確保細(xì)胞在培養(yǎng)過程中能夠正常生長和增殖。2、低pH值：培養(yǎng)基的pH值應(yīng)該保持在一定范圍內(nèi)，以促進(jìn)干細(xì)胞的增殖和分化。3、營養(yǎng)豐富：培養(yǎng)基應(yīng)包含豐富的營養(yǎng)成分，以滿足細(xì)胞生長和分化的需求。4、易于消化：培養(yǎng)基中的生長因子和刺激劑應(yīng)有助于促進(jìn)干細(xì)胞的消化和貼壁
2023
07-31

細(xì)胞學(xué)堂｜原代細(xì)胞培養(yǎng)包被如何操作
原代細(xì)胞具有貼壁特殊性，因此在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，常出現(xiàn)貼壁不牢的情況，因此我們需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被處理，以增強(qiáng)細(xì)胞的貼壁性。本期細(xì)胞學(xué)堂將為您詳述原代細(xì)胞培養(yǎng)中的包被操作步驟及注意事項，讓您的實(shí)驗(yàn)順暢無阻！01常用包被試劑為了適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求，需要對培養(yǎng)器皿用不同的物質(zhì)包被后使用，包被條件常選用膠原蛋白Ⅰ（12μg/mL）、多聚賴氨酸PLL（0.1mg/mL）和明膠（0.1%）三種，依據(jù)細(xì)胞種類而定。NO、1膠原蛋白Ⅰ膠原蛋白Ⅰ是最常見的膠原蛋白
2023
07-28

平衡鹽溶液的主要作用
平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)也叫生理溶液(PhysiologicalSolution)，是集緩沖液的緩沖力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體的，具有維持滲透壓、保持PH穩(wěn)定以及提供簡單的營養(yǎng)的作用，可滿足體外實(shí)驗(yàn)中組織、器官或細(xì)胞的生存和代謝的基本需要。一些平衡鹽溶液中還添加了少量酚紅，用以指示溶液的酸堿度變化。是在做腸道檢查前，專門用來清腸用的藥物，所以普通藥店是沒有賣的。其主要成分為氯化鈉、氯化鉀和硫酸鎂等，在腸道局部產(chǎn)生高濃度的電解質(zhì)環(huán)境，通

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