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2025
02-06

慢病毒轉染貼壁細胞全流程詳解
慢病毒轉染貼壁細胞全流程詳解一、細胞種板將細胞種在12孔板中，每孔1.5×10^5個細胞。每孔加入1mlwan全培養(yǎng)基。二、病毒感染1.待細胞生長至30%～50%時開始轉染。2.將病毒從冰箱取出，放在冰上融化。3.打開生物安全柜，關閉風機，戴好帽子和口罩。4.棄去培養(yǎng)基，用PBS洗三次。5.每孔加入500ulwan全培養(yǎng)基。6.根據(jù)公式計算每孔所需病毒量：每孔病毒量（μL）=MOIx細胞數(shù)/病毒滴度（TU/mL）×1000。7.4小時后，再向孔板中加入500ulwan全培養(yǎng)基，補足1ml。三、換
2025
01-23

小分子蛋白的WB該如何？
WB（WesternBlot）是一種常用的生物化學實驗技術，用于檢測和分析蛋白樣品中特定蛋白質的存在和表達水平。它通過將樣品中的蛋白質分離并轉移到膜上，然后使用特定的抗體識別目標蛋白，并通過化學或免疫檢測方法來可視化這些蛋白質。WesternBlot技術通常包括樣品制備、SDS-PAGE電泳分離、蛋白轉印、封閉和抗體檢測、曝光顯影等步驟。目前WB被廣泛應用于生物醫(yī)學研究中，用于研究蛋白質表達、翻譯后修飾以及蛋白質相互作用等。圖1.WB流程圖在日常實驗過程中，小分子蛋白是非常常見的，小分子蛋白是指
2025
01-21

明明凍存的時候細胞長得好好的，怎么一復蘇就完啦？
不知道大家是否會遇到細胞凍存的時候狀態(tài)非常不錯，結果等到需要用到該細胞的時候怎么也復蘇不起來的情況啊？或許可能是凍存細胞的時候出現(xiàn)了什么差錯？一.細胞凍存的原則：慢凍，細胞在冷凍過程中，如果降溫過快，會形成大的冰晶，這些冰晶會破壞細胞結構，導致細胞死亡。詳細版本見《細胞凍存的原理是什么？》二.凍存液的配置：常用配置比例：培養(yǎng)基:血清:DMSO=7:2:1適用于大多數(shù)細胞系，能夠保證細胞在凍存過程中有較高的存活率。血清:DMSO=9:1適用范圍：適用于需要長時間保存或者具有特別珍貴性的細胞系。血清
2025
01-20

CCK8實驗注意事項
CellCountingKit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的進行細胞增殖和毒性分析?；驹恚涸撛噭┲泻蠾ST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓liu酸2甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazandye）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。用途：
2025
01-20

CCK8實驗一文就懂！
前面我們在文章《為什么CCK8鏡下趨勢是對的，測出來的OD值卻不對？？》中cue到過CCK8實驗，那么CCK8具體到底是什么呢，讓我們今天一起詳細了解下吧~一、CCK-8實驗的基本定義與原理CCK-8實驗是一種廣泛應用于細胞生物學研究的細胞增殖和毒性檢測方法。其基本原理在于利用細胞內的代謝酶將無色的CCK-8試劑（CellCountingKit-8）中的WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2，4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽）還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚染
2025
01-17

流式細胞術的特點及應用
一、流式細胞術特點速度快:流式細胞術是一種快速的實驗技術，通過對單個細胞或生物顆粒進行逐個檢測，測量速度可達每秒數(shù)千甚至上萬個細胞。靈敏度高:每個細胞只需帶有1000~3000個熒光分子，流式細胞術就能夠準確檢測出來。這種高靈敏度的特性使得流式細胞術成為研究復雜生物系統(tǒng)和細胞內分子水平變化的重要工具。多參數(shù):可應用于多參數(shù)分析，通過多色熒光染色同時對單個細胞或生物顆粒的多種特征進行細致分析。這種高度精密的方法使研究人員能夠深入研究細胞的內部結構和功能，為疾病診斷和治療提供重要的參考依據(jù)。精度高:
2025
01-16

兩種流式細胞儀，你選哪種？
分析型流式細胞儀檢測原理將待測樣品制成單細胞懸液，在鞘液的包裹下進入流式細胞儀內的檢測區(qū)域，細胞在激光的照射下會發(fā)生散射和折射，產(chǎn)生的散射光信號和熒光信號由不同的通道接收。其中前向角散射光（FSC）的強度與細胞直徑成正相關，可以理解為細胞直徑越大，F(xiàn)SC越強，細胞直徑越小，F(xiàn)SC越弱。所以可以利用細胞的FSC值初步比較細胞的大小，利用FSC值對細胞進行分群和分類。側向角散射光（SSC）的強度與細胞內顆粒結構復雜程度成正相關（與細胞中所含的細胞器、細胞核等的數(shù)量成正比），可以理解為細胞內顆粒結構越
2025
01-16

流式細胞術一文Get
一、流式細胞術流式細胞術（FlowCytometry，F(xiàn)CM）從字面意義理解，F(xiàn)low—Fluid、Cyto—Cell、Metry—Measurement，是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒（如微球，細菌，小型模式生物等）逐個進行快速定量分析和分選的技術。其特點是通過快速測定庫爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來定量測定細胞DNA含量、細胞體積、蛋白質含量、酶活性、細胞膜受體和表面抗原等許多重要參數(shù)。根據(jù)這些參數(shù)將不同性質的細胞分開，以獲得供生物學和醫(yī)學研究用的純細胞群體。1.流式細胞術的關
2025
01-15

質粒提取常見問題案例梳理，助您實驗！
01出現(xiàn)嚴重的RNA污染如圖所示，質粒提取之后進行瓊脂糖凝膠電泳，出現(xiàn)明顯的RNA條帶，說明有RNA污染。原因及解決方法：（1）未在緩沖液RS*中事先加入RNaseA。解決方法：補加RNaseA。（2）加入RNaseA的緩沖液RS*長期保存于室溫，導致RNaseA活性下降。解決方法：每次使用后置于4℃保存。若長期不用，置于-20℃保存。（3）細菌過量,RNaseA不能有效降解RNA。解決方法：將細菌用量減半或增加RNaseA在緩沖液RS*中的濃度。02出現(xiàn)基因組污染（1）菌體裂解和中和過程中,劇
2025
01-15

怎么提高質粒超螺旋比例
一、質粒質粒是一種環(huán)狀的小分子DNA，是進行DNA重組的常用載體，在分子生物學研究和基因治療中對于質粒的產(chǎn)量和質量都有一定的要求，其中超螺旋比例和內毒素含量是影響質粒質量的兩個重要因素。雖然超螺旋通常是主要形式，但在所有質粒制備中，切口和線性DNA形式通常作為次要形式回收。但是，如果操作不當?shù)脑?，超螺旋形式的DNA質粒的收獲率可能不高，那么如何提高質粒DNA的超螺旋比例呢？二、提高質粒超螺旋比例的方法（1）在生長平臺期收獲細菌培養(yǎng)物在對數(shù)生長過程中過早收獲細菌時，經(jīng)常會看到帶切口的DNA。為避免
2025
01-14

Bemis 封口膜供應
一、公司介紹BemisManufacturingCompany是一家家族企業(yè)，成立于1901年?？偛课挥诿绹箍敌侵菹２┮粮査?，我們已發(fā)展成為一家服務于全球市場的創(chuàng)新型國際制造商。我們以自有品牌生產(chǎn)產(chǎn)品，并為其他公司提供專業(yè)知識，包括自有品牌產(chǎn)品和各行各業(yè)的零部件。我們服務于全球消費、商業(yè)、醫(yī)療和工業(yè)市場，在全球五個國家擁有2,000多名員工。Bemis代理——天津益元利康生物科技有限公司，提供Bemis封口膜等，歡迎電話咨詢。二、產(chǎn)品參數(shù)產(chǎn)品品牌：Bemis產(chǎn)品名稱：BemisPM-99
2025
01-13

細菌內毒素如何去除？
繼推出《細胞培養(yǎng)過程中如何避免內毒素的不良影響》《細菌內毒素的檢測方法》后，有沒有小伙伴想知道細菌內毒素如何去除呢？今天讓我們一起答疑解惑！前言：19世紀，ErnstvonBergmann提出了毒素的概念，他認為腐爛的液體含有一種水溶性但不溶于酒精、耐熱、不揮發(fā)的物質，這種物質會引起疾病癥狀。20世紀初，Pfeie等學者提出了內毒素的名稱，確定了整個細菌家族擁有基本相同的毒素，并發(fā)現(xiàn)了內毒素的熱原性和毒性之間的密切關系。20世紀中葉，Lüderitz和Westphal等學者從患者血清中分離出內毒
2025
01-13

金斯瑞ToxinSensor™顯色鱟試劑內毒素檢測試劑盒(L00350)現(xiàn)貨供應
產(chǎn)品名稱：金斯瑞ToxinSensor™顯色鱟試劑內毒素檢測試劑盒(L00350)現(xiàn)貨供應產(chǎn)品貨號：L00350產(chǎn)品品牌：Genescript產(chǎn)品簡介：金斯瑞ToxinSensor™顯色鱟試劑內毒素檢測試劑盒是一種體外細菌內毒素檢測系統(tǒng)，適用于人和動物注射用藥物、生物制品和醫(yī)療器械。該系統(tǒng)不適用于檢測許可試劑、臨床樣本中的內毒素或診斷人類疾病。鱟試劑（LyophilizedAmebocyteLysate，LAL）由來自鱟(Tachypleustridentatus)的變形細胞裂解物制成。金斯瑞T
2025
01-13

細菌內毒素的檢測方法
我們知道環(huán)境中廣泛存在的格蘭氏陰性菌容易污染生產(chǎn)過程，其裂解后會釋放出內毒素，因內毒素耐熱性和化學穩(wěn)定性強而難以滅活，所以一旦有內毒素污染進入血液，即使極少量也能引起發(fā)熱休克等嚴重反應，因而內毒素與其他已知熱原污染物相比，顯示更強的熱原性。而熱原檢測不同于無菌檢測，兩者應同時進行。無菌檢測通常檢測微生物產(chǎn)生的活生物體或孢子，但無法檢測內毒素，只能進行熱原檢測。下面我們來簡單了解有哪些檢測細菌內毒素的不同方法有家兔熱原檢查法、凝膠法(鱟試劑)、光度測定法(鱟試劑)、重組C因子法等一、家兔熱原檢查法
2025
01-09

碧云天edu細胞增殖試劑盒說明書
一、簡介BeyoClick™EdU-488細胞增殖檢測試劑盒(BeyoClick™EdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一種基于DNA合成過程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類似物EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)的摻入，并通過隨后的點擊反應(Clickreaction)使EdU被AlexaFluor488所標記，從而實現(xiàn)簡單、快速、高靈敏地檢測細胞增殖的試劑盒。碧云天代理——天津益元利康生物科技有限公司，提供碧云
2025
01-09

細胞因子風暴是什么？
一、什么是細胞因子風暴？細胞因子風暴（Cytokinestormsyndrome，CSS)，指機體感染微生物后引起體液中多種細胞因子如TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、MCP-1和IL-8等迅速大量產(chǎn)生的現(xiàn)象，是引起急性呼吸窘迫綜合征和多臟器衰竭的重要原因。現(xiàn)常見于新冠等病毒感染，CAR-T等免疫治療，以及噬血細胞性淋巴組織細胞增多癥等自身炎癥性疾病，可引起組織損傷，全身多器官衰竭，造成嚴重后果。二、細胞因子風暴會產(chǎn)生什么影響？細胞因子風暴一旦出現(xiàn)，
2025
01-08

qpcr結果和wb結果不一致？為什么呢
qpcr結果和wb結果不一致？是什么原因呢？今天讓我們來探討一下~一、實驗技術層面的原因(1)樣品制備與處理在qPCR中，如果總RNA樣品提取環(huán)節(jié)出現(xiàn)失誤，如取材到液氮速凍耗時過長導致RNA降解，或在制樣時沒有保持低溫環(huán)境、沒有有效防范外源性RNA酶的污染，都可能影響RNA的質量和qPCR結果的準確性。在WB實驗中，蛋白樣品制備環(huán)節(jié)同樣至關重要。如果取材到液氮速凍耗時過長或制樣時沒有保持低溫環(huán)境，可能導致蛋白降解。此外，如果沒有加蛋白酶抑制劑，也可能導致蛋白降解。另外，如果蛋白發(fā)生可逆性沉淀，如
2025
01-07

熱銷產(chǎn)品：USA Scientific 0.2ml PCR八連排(1402-4700)
USAScientific生產(chǎn)和分銷高質量的實驗室塑料、設備和配件。自1982年以來，USAScientific一直是值得信賴的實驗室合作伙伴。USAScientific大多數(shù)產(chǎn)品在美國制造。例如，TipOne®、TempAssure®PCR管和TempPlate®PCR板、所有密封膜和箔、塑料儲存盒和支架、血清學移液管、大多數(shù)管和設備等。產(chǎn)品簡介：USAScientific0.2mlPCR八連排(1402-4700)無彎曲帶經(jīng)過加固，可在搬運時抵抗彎曲。單獨連接的平蓋在光學上是透明的，可用于實
2025
01-07

細胞培養(yǎng)基能不能照紫外
細胞培養(yǎng)基作為細胞生長和維持的“營養(yǎng)液”，其質量直接影響到細胞的生存狀態(tài)和實驗結果的準確性。因此，了解和掌握細胞培養(yǎng)基的正確處理和儲存方法至關重要。本文將探討一個常見的問題：細胞培養(yǎng)基是否適合在紫外燈下照射？這一問題的答案不僅關系到細胞培養(yǎng)基的穩(wěn)定性，還可能影響到實驗的成敗。一、紫外燈的作用與風險紫外燈的殺菌原理紫外線（UV）是一種電磁輻射，根據(jù)波長的不同，可以分為UVA（320-400nm）、UVB（280-320nm）和UVC（100-280nm）。其中，UVC因其能夠破壞微生物的DNA和R
2025
01-06

基質膠354277特性和功能
雙恒電位儀是一種電化學研究儀器，其工作原理和應用領域上文已有詳細描述，這里不再贅述。需要強調的是，雙恒電位儀并不直接與基質膠相關聯(lián)，而是用于電化學研究、腐蝕監(jiān)測等領域的電化學測量和控制。基質膠354277(Corning貨號)是一種高質量的細胞培養(yǎng)基質膠，常用于支持細胞生長和分化。它來源于富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤提取物，并經(jīng)過特殊處理以形成具有生物學活性的三維基質。該基質膠模擬了體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化。主要成分：基質膠354277的主要成分

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